2018 课时分层集训38.doc

课时分层集训训(三十八)(建议用时：45分钟) (对应学生用书第337页)A组　基础达标 1．图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有、MboⅠ、种限制性核酸内切酶它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、、、CCC↓GGG。请回答下列问题。 图1 图2(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由________________连接。(2)若用限制酶完全切割图1中DNA片段产生的末端是________末端其产物长度为_________________________________________________(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T－A碱基对替换那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段用限制酶完全切________种不同长度的DNA片段。(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接形成重组质粒那么应选用的限制酶是________。在导入重组质粒后为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌一般需要用添加________的培养基进行培养。经检测部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达其最可能的原因是______________________________________________________________。[解析]　(1)题干中强调“一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基”可通过画出DNA结构示意图解决。(2)识别并切割的序列为CCC↓GGG所以产生的末端为平末端经切割后片段会形成三个小的DNA片段按切割位点算分别是：534＋3＝537(bp)；796－3－3＝790(bp)；658＋3＝661(bp)。(3)用D，会形成537 bp、790 bp、661 bp三种类型。题图1中虚线方框内C-G被T-A替换失去了一个酶切位点则会被切割成534＋796－3＝1 327(bp)和658＋3＝661(bp)两种类型。所以一共会得到537 bp、790 bp、1 327 bp、661 bp 4种类型的片段。(4)根据基因D和质粒的核苷酸序列可知可选用和进行切割但会破坏掉两种抗生素抗性基因因此只能用进行切割。[答案]　(1)2)平　537 bp、790 bp、661 bp(3)4 (4)BamHⅠ　抗生素B　同种限制酶切割形成的末端相同部分目的基因D与质粒反向连接2．(2017·江苏高考)金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因构建转基因工程菌用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下请回答下列问题： 【导学号 (1)从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA通过________获得________用于PCR扩增。(2)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1和引物2)为方便构建重组质粒在引物中需要增加适当的________位点。设计引物时需要避免引物之间形成________而造成引物自连。(3)图中步骤1代表________2代表退火步骤3代表延伸这三个步骤组成一轮循环。(4)PCR扩增时退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏________的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关长度相同但________的引物需要设定更高的退火温度。(5)如果PCR反应得不到任何扩增产物则可以采取的改进措施有________(填序号：①升高退火温度　②降低退火温度　③重新设计引物)。[解析]　本题主要考查目的基因的获取及PCR技术的有关知识。(1)依据题中表述现象分析合成目的基因的过程应为逆转录过程由mRNA直接逆转录形成的DNA为cDNA。(2)构建重组质粒时需要限制酶和DNA连接酶因此推测在引物中需要增加适当的限制酶识别的位点。设计引物时需要注意避免引物1和引物2之间形成碱基互补配对。(3)图中步骤1代表变性。(4)退火温度过高会破坏引物与模板链之间的碱基互补配对。由于含G/C碱基对多的DNA稳定性强因此在PCR过程中设置的温度应视G/C的含量而定。(5)温度过高不利于引物与模板结合；引物设计不合理也会PCR扩增反应。[答案]　(1)逆转录　cDNA　(2)限制性核酸内切酶　碱基互补配对　(3)变性　(4)引物与模板　GC含量高　(5)②③3．(2016·天津高考)人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值只能从人血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。 (1)为获取HSA基因首先需采集人的血液提取________合成总cDNA然后以cDNA为模板使用PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向请用箭头在方框内标出另一条引物的位置