胶体金免疫层析法.doc

附件1 促黄体生成素检测试剂（胶体金免疫层析法）注册技术审查指导原则 本指导原则的编写目的是指导和规范促黄体生成素检测试剂（胶体金免疫层析法）产品注册申报过程中审查人员对注册资料的技术审评，同时也可指导申请人的产品注册申报。 本指导原则是对促黄体生成素检测试剂（胶体金免疫层析法）的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。 本指导原则是供申请人和审查人员使用的指导文件，不涉及注册审批等行政事项，亦不作为法规强制执行，如有能够满足法规要求的其他方法，也可以采用，但应提供详细的研究资料和验证资料。应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的，随着法规、标准体系的不断完善和科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。 一、适用范围 本指导原则适用于采用双抗体夹心胶体金免疫层析技术原理对人体尿液中促黄体生成素进行定性或半定量体外检测的产品。 根据《体外诊断试剂注册管理办法》（国家食品药品监督管理总局令第5号）、《食品药品监管总局关于印发体外诊断试剂分类子目录的通知》（食药监械管〔2013〕242号），促黄体生成素检测试剂（胶体金免疫层析法）属于二类医疗器械，分类代码为6840。 二、注册申报资料要求 （一）综述资料 促黄体生成素（Luteinizing Hormone）是促性腺激素的一种糖蛋白激素，简称促黄体生成素，亦称促间质细胞激素（ICSH）。是由脑垂体前叶嗜碱性细胞分泌的一种大分子糖蛋白，由α和β两个亚基非共轭结合形成，其中β亚基具有决定其分子特异性的构型特征，可以识别适当的靶组织，并与特定的受体结合，进而发挥其生理功能，主要作用是刺激卵巢内成熟卵子的释放。正常女性体内保持有微量的促黄体生成素，在月经中期促黄体生成素激素的分泌量快速增加，形成一个“促黄体生成素峰”，并在此后2460小时内刺激卵巢内成熟卵的释放。因此，“促黄体生成素峰”前后13天内妇女最易受孕。 2.1产品原理：本试剂运用双抗体夹心胶体金免疫层析技术定性或半定量检测人体尿液中的促黄体生成素。检测时，当待测样本中的促黄体生成素浓度等于或高于临界值时，将与胶体金标记的抗β-促黄体生成素单克隆抗体反应形成复合物，在层析作用下反应复合物沿着硝酸纤维素膜向前移动，被硝酸纤维素膜上检测区（T）预先包被的抗α-促黄体生成素单克隆抗体捕获，最终在检测区（T）有红色条带出现即为阳性，提示“促黄体生成素峰”出现。当待测样本中促黄体生成素浓度低于临界值时，在检测区（T）形成一条颜色浅于质控区（C）的红色反应线或无红色反应线出现，此时检测结果为阴性，表示非“促黄体生成素峰”。无论待测样本中是否含有促黄体生成素，质控区（C）都会形成一条肉眼可见的红色反应线，这是判断样本量是否足够、层析过程是否正常的标准，同时也作为本试剂的内控。 μIU/mL的促甲状腺素（TSH）标准品样品液。 1.2.2干扰物质 潜在的干扰物质主要包括：乳糜尿、血尿、胆红素阳性、浑浊的尿液以及相关药物。 1.3阳性/阴性参考品 企业内部阳性/阴性参考品应可溯源到国家标准品。 1.4.钩状（HOOK）效应 目前，促黄体生成素检测试剂大多采用夹心法的原理检测样本，考虑到方法学的缺陷，有必要对钩状（HOOK）效应进行考虑，如图1所示。 图1 免疫复合物（IC）沉淀量与抗原抗体量的关系 1.研究方法 选择境内已批准上市的性能不低于考核试剂、预期用途一致的同类产品作为对比试剂，与之进行对比试验研究，证明考核试剂与已上市产品等效。 2.临床研究单位的选择 2.1第二类产品申请人应当选定不少于2家（含2家）临床试验机构，按照有关规定开展临床试验。 2.2临床试验样品的生产应当符合医疗器械质量管理体系的相关要求。 3.临床试验方案 临床试验实施前，研究人员应从流行病学、统计学、临床医学、检验医学等多方面考虑，设计科学合理的临床研究方案。临床研究方案应符合伦理学的相关要求。各研究单位选用的对比试剂应一致，以便进行合理的统计学分析。另外，考核试剂的样本类型不应超越对比试剂对样本类型的检测要求，如果选择了对比试剂适用样本类型以外的样本，则应采用其他方式进行验证。 各临床研究机构的方案设置应一致，且保证在整个临床试验过程中遵循预定的方案实施，不可随意改动。 4.研究对象的选择 4.1临床试验样本量的确定：申请人/临床研究者应根据产品临床使用目的，与该产品相关疾病的临床发生率确定临床研究的样本量。在符合指导原则有关最低样本量要求的前提下，还应符合统计学要求。 4.1.1临床试验的总样本数至少为200例。 4.1.2应考虑样本量的分布。样本量的选择应符合统计学及相关指导原则