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实验室标准规范操作规程sop
实验室标准操作程序
（SOP）
版 号：第一版
编 制：
审 核：
批 准：
受控状态：
发放编号：
持 有 人：
发布日期: 2007年08月08日 实施日期: 2007年08月08日
更 改 一 览 表
序号 更改时间 更 改 章 节 号 更改单号 备 注
1．10灭菌均质杯
1．11酒精棉
1．12天平:感量0.1g
2．培养基的制备
2.1 生理盐水:
称氯化钠8.5g溶于1000.0ml蒸馏水中,分装锥形瓶和试管内,每管吸9ml，121℃高压灭菌。
2.2平板计数琼脂
称平板计数琼脂23.5g加入1000.0ml蒸馏水中，煮沸溶解，分装锥形瓶内，121℃高压灭菌。
3.操作程序
3.1样品稀释
以无菌操作取25g样品 放入装有225ml生理盐水的灭菌均质杯内，
均质1分30秒，制成1：10的样品匀液 用灭菌吸管吸取1ml样液
放入9ml生理盐水中，摇匀。 从试管中吸取1ml样液 分别注入两个平皿内，
制成10倍的样品稀释液， 依次类推（10-2、10-3） 平板计数琼脂（恒温45±1℃）
分别倒12-15ml平板计数琼脂入各平皿 待琼脂凝固后将平皿翻转
立即将平皿内的样液和琼脂充分混合 将平皿旋转，注意倾注时间不宜太长
立即放进36±1℃的恒温培养箱内 培养48±2h
3.2培养
4.计算如下表（备注：25-250个菌落为合适范围，菌落成链状明显的计为一个菌落，不明显的不计数，平皿边缘和琼脂表面成水膜样菌落或生长过量的，即报告为蔓延菌落。）
样品号 菌 落 数 平皿菌落数 1：10 1：100 1：1000 1 238 16 0
212 18 0 2.3×103个/g 2 236 26 0
227 28 0 2.5×103个/g 3 18 0 0
14 4 0 1.6×102个/g 4 多不可计 245 23
多不可计 278 20 2.6×104个/g 5 0 0 0
0 0 0 ＜10个/g 6 多不可计 255 21
多不可计 225 40 2.7×104个/g 7 多不可计 210 18
多不可计 240 28 2.3×104个/g 8 多不可计 260 30
多不可计 230 28 2.7×104个/g 9 多不可计 多不可计 523
多不可计 多不可计 487 5.1×105个/g 10 多不可计 245 35
多不可计 230 蔓延菌落 2.9×104个/g
02.出口食品大肠菌群和大肠杆菌的检验方法
仪器和设备
1．1恒温培养箱：36±1℃
1．2恒温水浴箱：44.5±1℃
1．3高压灭菌锅
1．4均质器
1．5试管:18×150mm、18×180mm
1．6锥形瓶:500ml 250ml
1．7平皿：直径为90mm
1．8灭菌均质杯
1．9灭菌吸管
1．10酒精棉
1．11天平：感量0.1g
1.12冰箱：0-4℃和-15～-20℃
1.13显微镜
2．培养基的制备
2.1月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤
称35.6g溶于1000.0ml蒸馏水中，加热煮沸充分溶解，分装于有倒立的小发酵管的18×180mm试管中，每管1
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