第8章节 致癌作用.pptVIP

第六节 化学致癌物筛查的基本方法 化学致癌物 定性判别：受试物是否致癌 定量判别：剂量-反应关系 常用方法 短期实验 动物致癌实验 人类流行病学检查 化学致癌物筛查的基本方法 化学致癌物的判别证据 人群流行病学调查 动物实验 限制和干扰因素多 花费大、周期长、使用动物数量大 评价化学致癌物的常用方法 定量-构效关系分析 遗传毒性组合试验 细胞恶性转化试验 哺乳动物致癌试验 人群流行病学调查 初筛 化学致癌物筛查的基本方法 化学致癌物筛查的基本方法 一、定量构效关系分析（quantitative structure-activity relationship，QSAR） 利用理论计算和统计分析研究化学物结构与其生物学效应间的定量关系 构效关系分析从一种同系物着手，找出该系物质化学结构中与致癌性关系最密切的结构成份，以及其他结构成分改变时对其致癌性的影响 快速、经济、有效 分析方法不统一，未结合生物因素 化学致癌物筛查的基本方法 二、遗传毒性试验 通过以致突变试验作为致癌物筛检。遗传毒性致癌物可能有多种致癌机理，因此要求试验组合尽可能反映较多的遗传学终点。 短期试验有Ames试验、哺乳动物细胞tk正向突变试验、微核试验、染色体畸变试验、UDS和SCE试验等。 遗传毒性试验 化学致癌物筛查的基本方法 三、细胞恶性转化试验 受试物与正常细胞在体外接触，如有致癌作用，可使正常细胞形态、功能发生变化，出现癌细胞的表现 观察终点：细胞恶性变 接触抑制消失、灶性生长 接触抑制是将多细胞生物的细胞进行体外培养时，分散贴壁生长的细胞一旦相互汇合接触，即停止移动和生长的现象。细胞增殖到一定程度,也就是互相挨在一起的时候,糖蛋白识别了这种信息,就会使细胞停止继续繁殖,这种现象就叫做接触抑制。 化学致癌物筛查的基本方法 细胞恶性转化试验 用于恶性转化试验的细胞 原代细胞，如叙利亚仓鼠胚胎细胞（SHE细胞） 动物细胞系，如BALB/C-3T3细胞 病毒感染细胞，如SA7/SHE细胞 体外容易培养和传代、 阴性细胞克隆背景较低 细胞自发突变率低或 自发转化能力较弱，动 物裸鼠试验呈阴性 已获无限生长能力， 但仍保持接触抑制而无 致瘤性的细胞系 细胞选择原则 化学致癌物筛查的基本方法 细胞恶性转化试验 细胞恶性转化结果判定标准： 细胞形态学及生长状况的改变 染色体核型异常 细胞转化灶形态 半固体琼脂培养基中形成集落的能力 在免疫抑制动物或裸鼠体内的致瘤能力 化学致癌物筛查的基本方法 四、哺乳动物致癌试验 观察时间 靶器官范围 哺乳动物 致癌试验 哺乳动物 短期致癌试验 哺乳动物 长期致癌试验 在有限观察时间范围内，观察的靶器官限定为一个而非全部器官和组织 ，有限动物试验（limited in vivo bioassay） 终身试验（life-time test），经典的和公认的化学物致癌性检测方法 化学致癌物筛查的基本方法 （一）哺乳动物短期致癌试验（limited carcinogenicity study） 常用的哺乳动物短期致癌试验 （1）小鼠肺肿瘤诱发试验 （2）雌性SD大鼠乳腺癌诱发试验 （3）大鼠肝转变灶试验 （4）小鼠皮肤肿瘤诱发试验 在给与受试物后，多次持续给予促癌剂，在20-30周左右观察靶组织有无肿瘤 化学致癌物筛查的基本方法 不是成组试验，应根据受试 物特点选择使用 应遵从长期动物致癌试验的 一般要求 阳性结果的意义与长期动物 致癌试验相似 阴性结果不能排除受试物的 致癌性 观察终点不是病理确认的恶性肿瘤，而是癌前病变（腺瘤或者瘤性增生结节） 哺乳动物短期致癌试验 化学致癌物筛查的基本方法 （二）哺乳动物长期致癌试验 （long-term carcinogenicity study） 下列情况应考虑进行长期致癌试验 （1）人体可能长期暴露于该化学物 （2）该化学物或其代谢物化学结构与已知致癌物相似 （3）反复染毒毒性试验提示该化学物可能产生癌前病变 1. 动物选择 物种、品系 特定的靶器官：大鼠-肝癌；小鼠-呼吸道或肺肿瘤；金黄地鼠-膀胱癌 无法知道靶器官：大、小鼠 需考虑自发肿瘤率 年龄和性别 选用断乳或断乳不久的动物； 性别一般要求雌雄各半。 数量 每组动物数较一般毒性试验多。 一般每组动物数雌雄各50只。 化学致癌机制 体细胞突变学说 DNA加合物 癌基因、原癌基因激活及抑癌基因失活 DNA错误修复 （一）DNA加合