第六章I-目的基因与载体的连接.pptVIP

徐师大屈艾老师制作 屈艾制作 * 能具有调控机能的目的基因置于报告基因的 适当位置。 3、若某一目的基因可能有增强子作用，则应在报告基因 的适当部位设计一个插入位点，以插入一个功能基因，并由此来反映增强子的作用。 徐师大屈艾老师制作 屈艾制作 * 二、简答题 1、在人工重组时，当目的基因DNA末端与载体末端不匹配时，必须转换其中一个或两个片段的末端形式以便使之连接。请说出末端转换的主要方法和转换使用的主要工具酶是什么？ 2、简要说明目的基因与载体DNA分子的5种连接方法。 徐师大屈艾老师制作 屈艾制作 * 屈艾制作 屈艾制作 * 第6章I 目的基因与载体 的连接（重组） * 一.基因重组—基因工程的核心 1、 外源DNA片段同载体分子连接的方法，即DNA分子体外重组技术，主要是依赖于限制性核酸内切酶和DNA连接酶的作用. 基因重组: 就是利用 限制性内切酶及其他一些酶类，切割和修饰载体DNA和目的基因．将两者连接起来，将目的基因插入于可以自我复制的载体内，再转入受体细胞，以期这种外源性的目的基因在受体细胞内得到扩增或正确表达。 * 2、连接前的准备： 依不同的研究目的而定，认真设计最终构建的重组体分子。需要考虑下列2个方面。 如果研究目的是： 表达