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第三章讲 基因工程制药1.ppt
第三章 基因工程制药专题;第一节 基因工程的基本原理;基因工程技术建立的前奏;基因工程最基本的过程;基因工程研究的主要内容;基因工程制药的基本目的;第二节 基因工程研究内容的提纲; 基因工程工具酶;;连接酶;其他;基因工程载体;;; 柯斯质粒中克隆外源基因示意图 ;pYAC载体克隆 示意图 ;;;目的基因的获得;PCR技术;; 真核生物目的基因的获得;;; 目的基因导入受体细胞 ;;;重组体的筛选;;Southern blotting;Northern blotting or Western blotting;第三节 目标基因的高效表达 ;一. 表达系统的选择和改造; 高表达的含义; 大肠杆菌表达系统;枯草杆菌系统;链霉菌;真核生物生产药用蛋白质的特殊性;真核体系中基因表达复杂性; 酵母菌;;杆状病毒感染的昆虫表达系统;杆状病毒转化载体;;哺乳动物表达系统;适用于哺乳动物细胞的表达体系;; 我们实验室正在进行的工作 盘基网柄菌（Dictyostelium discoideum）系统; 注： +++，十分适合；++，很适合；+，一般； - ，差 ;优点:;二. 载体系统的选择和改造;;;;三. 培养工程策略和发展;存在的三大问题;;降低磷酸转移酶的活性，减少丙酮酸的合成； 降低磷酸转乙酸基酶活性，减少乙酸形成； 加强6-磷酸葡萄糖合成糖元途径以减少丙酸的形成； 通过克隆Acetolactate Synthase基因，将丙酮酸引向毒性小50倍以上的acetoine合成，从而减少乙酸的合成。 降低EMP速度 还原乙酸到乙醇 酶缺乏 加VHB基因;3. 基因工程菌的培养工程;第四节 重组蛋白类药物简单介绍;一. 重组激素类药物;;;;;人生长激素;;二.重组细胞因子类药物;;;;;三 重组溶血栓药物;;U-PA
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