厌氧菌操作流程.pdfVIP

微生物之家论坛：/forum 或 /forum 厌氧菌培养操作规程 第一部分 标本采集和运送 有厌氧菌感染指征时，需进行微生物学诊断。而标本的采集和运送是否合格， 对厌氧菌检验结果影响很大。要求标本绝对不能被正常菌群所污染。采集时尽量 避免接触空气。临床在进行厌氧菌培养前还应与实验室联系，做好接种培养的准 备，进行床边接种或采用输送培养基。 一、标本采集 标本应从正常无菌部位或通过严格无菌技术采集，血液、胸腔液、腹腔液、 心包液、关节液、胆汁、脑脊液及通过外科无菌手术抽出的脓液等，与常规方法 相同。用特殊技术或方法采取的标本，采集部位与方法如下： 1、肺部 肺部分泌物可经气管在环甲膜平面以下抽取，或用纤维支气管镜。 带有保护取样刷不被正常菌群污染的套管。将取样刷剪下。可放入运送培养基或 床边直接接种。 2、胸腔 直接胸腔穿刺。 3、尿道 耻骨联合上方经皮肤穿刺膀胱抽尿。 4、脓肿 封闭性脓肿用无菌空针抽取。如已破溃，用无菌棉拭子擦去表面 脓液。取深部分泌物。 5、女性生殖道 消毒阴道从后穹隆穿刺，取脓液。若取子宫分泌物则用无 菌导管抽取，导管外套以一个保护膜套管，插入子宫后才戳穿保护膜套管，在子 宫内取标本。 6、窦道或深部伤口 用空针连着导管，尽可能深入抽取。伤口底部、边缘 和窦道壁上刮下来的组织也是很好的标本，更能反映感染的细菌。若标本量太少， 可适当加少量无菌盐水，冲洗后再吸出。 7、血液标本 毛囊和皮脂腺深部的丙酸杆菌易造成污染。用碘酊消毒后必 须等一定时间，不要立即抽血。 其它注意事项：必须通过用于厌氧菌正常栖居地才能取到的标本，如痰、支 气管镜采样（无特殊保护套）、咽拭子、排出的尿及阴道拭子不能做厌氧菌培养， 粪便标本厌氧菌培养．只能做难辨梭菌及肉毒杆菌的培养。 微生物之家论坛：/forum 或 /forum 在无条件床边采样时，尽快将空针中的气体排尽，用消毒空针抽取厌氧培养 标本，将针头插入无菌像皮塞。必须用棉拭子采集的标本．可立即做床旁接种或 插入运送培养基中送细菌室培养 二、标本运送 1、标本送入厌氧运送装置后，应尽快送到实验室，最迟不超过6小时。标 本不应放在冰箱里，低温对一些厌氧菌有害，且低温下标本吸收氧气较多。 2、厌氧培养基：Anaerobe Basal Agar（OXOID公司商品）+5%脱纤维羊血。 微生物之家论坛：/forum 或 /forum 第二部分 厌氧菌检验流程 临床标本 观察标本外观，紫外灯 接种厌氧血平板 接种需氧血平板 下有无荧光，有无臭味。 革兰染色检查 厌氧培养（48 小时） 需氧菌鉴定 第一次耐氧试验 确定是否厌氧菌 挑可疑厌氧菌落 每个菌落接种 2 种平皿 （厌氧血平皿及需氧血平皿） 需氧培养 厌氧培养（48 小时） 涂片、革兰染色 生长 第二次耐氧试验 生长 不生长 兼性厌氧菌或 需氧菌 需氧培养 厌氧培养（48 小时） 第三次耐氧试验 不生长 生长 专性厌氧菌 分离鉴定