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13.缺氧与耐缺氧-学生版
* * 节次:机能实验学2 第5次课 内容:缺氧与耐缺氧 学时:4h 时间:2016年11月 地点:西安交通大学医学部机能实验中心 呼吸 外呼吸:肺通气和肺换气 气体在血液中的运输:O2、CO2运输 内呼吸:组织中气体交换、线粒体氧化磷酸化 (氰化钾, 叠氮钠中毒) (贫血,CO中毒, 亚硝酸盐中毒) (组织缺血/淤血) 前言 实验对象:小白鼠 方法:用物理、化学方法复制不同类型的缺氧模型 观察:各种缺氧情况下动物的活动状态,血液颜色及死亡情况,了解缺氧对呼吸、循环系统的影响。 材料与方法 动物:小白鼠,雌雄不拘,体重18-23g。 药品与试剂:1%苯甲酸钠咖啡因注射液、0.1%复方冬眠灵注射液、苦味酸、甲酸、浓硫酸、5%氢氧化钠、5%亚硝酸钠、1%美兰、0.05%叠氮钠。 材料与方法 乏氧性缺氧(2只小鼠) a. 0.1ml/10g剂量腹腔注射冬眠灵 放入一缺氧瓶(瓶中事先加入2粒钠石灰) 10min后盖紧瓶塞,放入0~4℃冷水,开始计时。 b. 0.1ml/10g剂量腹腔注射咖啡因 放入一缺氧瓶 5min后盖紧瓶塞,38~40℃热水,开始计时。 上述5min、10min为药物起效过程,可先取1只小鼠注射冬眠灵,5min后再取1只小鼠注射咖啡因,这样可同时盖紧瓶塞计时。 记录存活时间,尸检观察皮肤、黏膜、血液颜色。 材料与方法 CO中毒(2只小鼠) a. 一氧化碳发生器(甲酸+浓硫酸) 小鼠放入广口瓶至死亡 b. 正常小鼠颈椎脱位法处死,心脏取血 c. 分别滴加等量氢氧化钠观察颜色变化 CO制备:甲酸3~4ml,加热至沸腾,再慢速向下滴浓硫酸 氢氧化钠:血红蛋白中Fe2+氧化为Fe3+,呈棕褐色 材料与方法 亚硝酸钠中毒(2只小鼠) ( Fe2+氧化为Fe3+ ) a.腹腔注入5%亚硝酸钠0.1ml/10g 腹腔注射1%美兰0.2ml/10g。 b. 腹腔注入5%亚硝酸钠0.1ml/10g 叠氮钠中毒(1只小鼠)( 剧毒) 腹腔注射0.05%叠氮钠溶液(0.4ml/10g) 材料与方法 观察项目 药物注射后小鼠呼吸,运动情况。 记录各组小鼠存活时间。 小鼠口唇,耳廓颜色。 尸检取血,对比血液颜色。 l. 小白鼠腹腔注射,宜从左下腹进针,避免伤及肝脏,也应注意勿将药液注入肠腔。 2. 注意强调两个缺氧瓶容积相等,即瓶子大小和瓶塞大小均要一致。 3. 缺氧瓶须密闭,盖紧瓶塞前先放入一小袋钠石灰(约 5g),以吸收小白鼠呼出的CO2。 4. 复制CO中毒模型时,通入CO浓度不宜过高,注意控制浓硫酸的滴入速度, 防止小白鼠迅速死亡,影响观察。 5. 小白鼠死后立即心脏取血,加NaOH的量与血液的量相仿。 6. 氰化物为剧毒,用后要洗手。CO为有毒气体,实验中通风要好,注意安全,实验结束后应妥善处理死亡动物。 【注意事项】 * *
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