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样品前处理技术在色谱中的应用 Your Subtitle Goes Here 摘 要 色谱分析已成为当今分析化学领域应用最广泛的 一种分析测试手段，应用范围涉及医药、环保、生 命科学、石油化工等几乎所有基础和研究领域。由 于色谱分析常常用于各种复杂的基体以及低含量组 分的分析，消除基体干扰，提高分析灵敏度，延长 仪器寿命是一个普遍需要解决的问题，因此，对样 品进行色谱分析前处理变得非常重要。 * 迄今为止，样品前处理的方法很多，本质上可分为两大类: 一类：是对检测器响应弱(或无信号)的样品，通过衍生技术 改变其物理和化学性质，使之成为可被检测的化合物。 另一类是通过对复杂基体样品中低含量组分进行分离、纯化 和富集以获得同样效果。 * 衍 生 技 术 * 随着液相色谱技术的发展，要求使用通用型的高灵敏检测器，但迄今为止，高效液相色谱还没有一个足以同气相色谱相比拟的通用型检测器。例如，示差折光检测器虽然是一通用型检测器，但其灵敏度远不如气相氢火焰离子化检测器，而且干扰因素太多，在工作过程中很容易受到周围温度和流动相流速的影响，并且不能进行梯度洗脱。紫外和荧光检测器比示差折光检测器则要灵敏得多，对温度变化不敏感，适于梯度洗脱。但是要求被测样品有紫外吸收或能被激发产生荧光，故属于选择性检测器。为了扩大高效液相色谱的适用范围，提高检测灵敏度和改善分离效果，采用化学衍生法是一个行之有效的途径。 * 化学衍生法：借助化学反应给样品化合物接上某个特定基 团，从而改善样品混合物的检测性能和分离效果。 化学衍生法主要有以下几个目的: (1)提高对样品的检测灵敏度 (2)改善样品混合物的分离度 (3)适合于进一步作结构鉴定，如质谱，红外或核磁共振等。 * 紫外(发色团) 较大的摩尔吸收系数 荧光 较大的摩尔吸光系数 良好的发光发色性能 对官能团高度选择 易分离、稳定 衍生物的荧光信号应远高于溶剂的背景吸收 试剂合成方法简单，原料易得、毒性小等 提高检测灵敏度 背景噪音变小 荧光衍生物的检测水平一般为10-12-10-14 mol/L 衍 生 醇、酸、糖、雌激素，生物碱的检测，其中在氨基酸样品的分析方面应用最为广泛 * 分离、纯化、富集技术 * 固相萃取(Solid Phase Extraction, SPE ) 液相色谱原理 富集、纯化 应用于：水中有机污染物的痕量富集、水中半挥发性有机物的测定及大气和土壤样品的前处理中。 * 基质固相分散萃取(MSPDE) MSPDE是在SPE基础上改进后的样品前处理方法 涂有C18键合相和其它聚合物的担体 样品(固态或液态) 研磨 半干状态 填料装柱 不同溶剂淋洗 含待测物的洗 脱液（萃取液） 直接进样 巨大表面积 去垢效应 结构破碎 分布均匀 * 固相微萃取(Solid Phase Microextraction. SPME) 在固相萃取(SPE)基础上发展起来，它采用一根聚合物涂层的熔融石英纤维从样品基质中或样品上方的顶空气体中直接吸附萃取待测物，然后在色谱进样口解吸、分析。 适用于挥发性与非挥发性物质的分析 * SPME的试验方法： 直接法 顶空法 膜保护法 衍生化法 * 管内固相微萃取(in-tube Solid Phase Microextraction, in-tube SPME) 1997年，Eisert和Pawlisz”推出管内固相微萃取(in-tube SPME)与高效液相色谱联用的设计，实现了样品前处理与分离检测的一体化，具有高效、快速、重现性好、可自动化操作，萃取涂层易得等优点。但一般用于萃取的内壁涂层毛细管比较小，无法提供较高的萃取效率。有机聚合物整体柱材料具有可调控的孔结构，可方便地引入不同种类的功能团，并可由简便的原位聚合方法得到，其对流传质的性质也是分利于作吸附材料。因此将有机聚合物整体柱用于管内固相微萃取，可获得很好的富集倍数。 * 电纺纳米纤维固相微萃取 制备柱 样液置于微柱 空气压柱 淋洗柱床 清洗柱床、柱壁 收集洗脱液 检测 * 纳米纤维的特殊结构使它显示出独特而优异的性能。表面众多吸附活性中心的存在使其可能吸附周围目标物，为其作为萃取介质提供了理论基础。与现有萃取材料