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清平糖浆的抗菌作用研究 清平糖浆的抗菌作用研究 摘 要： 目的:观察清平糖浆的抗菌作用。 方法:采用二倍稀释法测定清热饮标 准菌株金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、乙型溶血性链球菌及肺炎球菌的 MIC （最低抑菌浓度）与 MBC（最低杀菌浓度） 。结果:清平糖浆对四种菌株均有一 定的抗菌作用。 关键词：清平糖浆；抗菌作用；MIC；MBC 清平糖浆是预开发的新制剂，具有清热解毒的功效，拟用于温病发热、流行 性感冒等疾患。本实验对其抗菌作用进行了研究。 1 材料 清平糖浆浸膏， 每 1mL 浸膏相当于生药 6.5g； 金黄色葡萄球菌 CMCC26003、 肺 炎 球 菌 CMCC31001 、 肺 炎 克 雷 伯 菌 CMCC46114 、 乙 型 溶 血 性 链 球 菌 CMCC32210；MH 琼脂基、MH 肉汤基、血琼脂基础基、小牛血清、兔血、营 养肉汤；高压蒸汽灭菌锅、普通培养箱、厌氧培养箱、N2、CO2、菌落记数仪、 溴氧离子发生器。 2 操作步骤 参照《卫生部药政局新药临床前研究报导原则》中“抗菌药体外抗菌试验原 则”及《药品微生物学检验手册》中的“药物抗菌作用试验方法”，采用二倍法测 定 MIC 与 MBC。 2.1 制备菌液 2.1.1 金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌液的制备 取金黄色葡萄球菌新鲜斜面接种于 10ml 肉汤中，取肺炎克雷伯菌冻干菌种 经开封后接种于 10mlMH 肉汤，经 36培养 48h 后，用 10 倍法稀释至 10-7，并 用平板法进行记数。 2.1.2 肺炎球菌、乙型溶血性链球菌液的制备 取肺炎球菌、 乙型溶血性链球菌冻干菌经开封接种于 5％小牛血清 MH 肉汤 基中，3548h 厌氧培养后染色镜检确定无污染，用 10 倍法稀释至 10-7，同时 用血清平板经厌氧培养 48h 后记数。 2.2 供试液制备 取清平糖浆 2ml 于试管中，加入待测菌的双倍基 2ml 混匀作为 1/2 供试液。 取 12 支灭菌试管， 每管各加待测菌培养基 2ml， 从 1/2 供试液中按二倍法稀释为 不同的供试液浓度 （测试管） ， 将第 12 管中多余的 2ml 吸入另一支试管中作为阴 性对照，并对测试菌进行阳性对照试验。 2.3 MIC 试验 2.3.1 金黄色葡萄球菌 MIC 的测定 取金黄色葡萄球菌菌液 10-6 与肺炎克雷伯菌 10-6 菌液各 0.1ml 分别加入供 试液的测试管中， 置冰箱 4 12h 后于 36中培养 48h，以最低浓度生长菌前一 澄清无菌生长管为最低抑菌浓度试验管，阴性对照管应无菌生长，阳性对照管应 有菌生长。 2.3.2 肺炎克雷伯菌菌与乙型溶血性链球菌 MIC 的测定 取肺炎克雷伯菌菌液 10-5 与乙型溶血性链球菌 10-5 菌液各 0.1ml，同上法 操作。 2.4 MBC 试验 2.4.1 金黄色葡萄球菌 MBC 的测定 经 36 48h 培养的金黄色葡萄球菌及肺炎克雷伯菌的各最低浓度抑菌管及 前两个浓度管，每管各加两个含 5%小牛血清的 MH 琼脂平板，每平板各加该测 试液 0.1ml，用 L 棒推匀，经 36下 24～48h 观察记数，每两平板菌数即为该管 含菌量。以菌落数在 5 个以下测试管为最低杀菌浓度。 2.4.2 肺炎克雷伯菌菌与乙型溶血性链球菌 MBC 的测定 取经 3548h 厌氧培养的肺炎球菌及乙型溶血性链球菌的各最低浓度抑菌 管及前 2 个浓度管，每管各加 2 个血平板，每平板各加该测试液 0.1ml，同上法 操作。 3 实验结果(见表 1) 4 讨论 流感是一种常见多发 1