嘉兴第二期高中生物新课程试验操作主办嘉兴教育装备与信息.docVIP

嘉兴市 第二期高中生物新课程实验操作 主办： 嘉兴市教育装备与信息中心 嘉兴教育学院 协办： 北京川布兰生物技术开发有限公司 培训说明 培训内容：高中生物新课程选修模块1相关内容实验的实验器材使用、实验操作等。 参加人员：全市高中生物新课程相关教师（未参加过第一期培训）。 培训地点：嘉兴市秀州中学（嘉兴市禾兴北路）。 培训时间：2010年11月3日—2010年11月5日,每天30名老师；具体安排如下： 11月3日，嘉兴市本级30名；11月4日，加善(10名)、平湖(10名)、海盐(10名)；11月5日，桐乡(15名)、海宁(15名)；上午8：45分开始，下午3：40分结束,具体学校参加老师由各县（市）教研室安排。 本次培训实验教室为秀州中学新课程实验室。每天30人，分为两组，每组15人。每组在两个实验桌上进行实验。前两排实验桌实验内容为 微生物实验、PCR、比色计的使用。后两排实验桌内容为果 胶酶实验、植物的组织培养实验等。例如，一组上午在前两排实验桌完成微生物实验、PCR、比色计的使用的实验后，下午将转到后两排实验桌。同理，二组实验老师上午也是在后两排完成实验后，下午转到一排做相关实验。 培训具体时间安排 级别 时间 培训内容 培训方式 一组 8:45-9:45 微生物实验（大肠杆菌划线分离，涂布稀释法分离） 讲课与实验 10:00-11:00 PCR与比色计的使用 讲课与演示 13:25-14:25 果胶酶实验 讲课与实验 14:40-15:40 植物组织培养 讲课与实验 级别 时间 培训内容 培训方式 二组 8:45-9:45 果胶酶实验 讲课与实验 10:00-11:00 植物组织培养 讲课与实验 13:25-14:25 微生物实验（大肠杆菌划线分离，涂布稀释法分离） 讲课与实验 14:40-15:40 PCR与比色计的使用 讲课与演示 培训相关实验 培训中实验操作内容以下划线标出 实验1.大肠杆菌的培养和分离 实验目的 进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进行细菌培养的操作。 进行大肠杆菌的分离，用固体培养基进行细菌的划线培养。 说明大肠杆菌的培养条件和操作要求。 实验材料（实验1备品盒） 配制LB液体培养基，试剂盒中每组称取1.25g，加水50mL溶解，调PH值。 配制LB固体培养基，每组称取1.8g，加水40mL沸水浴加热至溶解,调PH值。配制LB固体培养基是用来倒平板和倒试管斜面。 注意事项：从培养基的原始配方上讲，配制溶解好的液体和固体培养基是不需要PH调节的。但是我们必须用精密PH试纸或者PH计来测量配制好的培养基。培养基的PH应该在7.0。PH值可能会因为物质的配比等原因而改变。我们可以用1mol/L的NaOH的HCl溶液在调节培养基的PH值。 实验步骤 培养基灭菌。在两个150mL的三角瓶中分别装入50mL LB液体培养基和40mL LB固体培养基（刚配好，尚未凝固，按照每个平板20mL计算），加上封口膜(一种塑料薄膜，中间有小孔和滤膜。既可以通气，又不使细菌进入。)。将培养皿用牛皮纸包好，放入灭菌锅中，灭菌15min。 同时将需要灭菌使用的培养皿、试管、三角瓶等和所用器械（接种环、镊子等）等一块灭菌。 超净工作台倒平板，倒斜面。 灭菌后。将有培养基的三角瓶和灭菌后，试管等培养皿放在灭菌后的超净工作台上。 超净工作台操作：打超净工作台的紫外灯（注意：打开紫外灯后人必须离开），持续30min，关闭紫外灯，打开过滤风的白炽灯。 将有培养基的三角瓶和培养皿放在灭菌后的超净工作台上后，点燃酒精灯，用镊子夹出酒精棉球擦拭桌面，并用酒精棉球擦手。待固体培养基冷却到60℃时（手放上还有些热的时候），在酒精灯火焰旁，以右手无名指及小指夹持含有固体培养基的三角瓶的封口膜，右手其他三个手指拿着三角瓶；左手拿着培养皿，并打开上盖的一边，将三角瓶的培养基约20mL倒入1 个培养皿中。倒入后立即置于水平位置上，轻轻摇晃，使培养基铺满培养皿底，待凝，使之形成平面。 倒斜面（试管内空白斜面），用玻璃漏斗倒入试管内，每试管2mL。试管斜靠在平放的铅笔上，冷却凝固。 液体培养基用于大肠杆菌的扩大培养。 将大肠杆菌和有液体培养基的三角瓶放在左手中，靠近酒精灯火焰；右手拿着接种环，并用右手无名指和小指夹住斜面的棉塞和三角瓶封口膜。接种环在火焰上烧红，再深入到斜面，使环接触培养基冷却后，再取菌种。将菌体放入三角瓶的封口膜和斜面的棉塞复原。三角瓶在37℃摇床上震荡培养12h（转速200转/分）。这一步骤由老师完成。 划线分离，分离菌种。 在酒精灯火焰上灼烧接种环，将摇床上培养12h的菌液（老师代做）打开，接种环部分深入到菌液中（只一次）。然后，在固体培养基的平板上连续划，接种环只在菌液中蘸菌液一次，划线后