[理化生]h课题1_微生物的实验室培养.pptVIP

平板划线接种 2、稀释涂布平板接种 原理： 将菌液进行一系列梯度稀释，并将不同稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。 当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成 的标准菌落。 二 实验操作 （一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 称量 溶化 灭菌 倒平板 ③在灭菌前, 用牛皮纸、旧报纸包紧盛有 培养基的锥形瓶的目的是什么？ 计算 在灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞,在取出培养基锥形瓶时也起到隔绝空气中杂菌污染的作用。 二 实验操作 （一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 称量 溶化 灭菌 倒平板 ④培养皿能否用高压蒸汽灭菌？ 计算 不能，因为培养皿要保持干燥，应该用干热灭菌。 倒平板 倒平板操作的讨论 1.培养基灭菌后要冷却到50OC时倒平板。用什么办法来估计培养基的温度？ 用手触摸锥形瓶，温度下降到刚刚不烫手时即可开始倒平板。 2.为什么要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？ 空气中微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。 二 实验操作 （一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 称量 溶化 灭菌 倒平板 计算 （二）纯化大肠杆菌 二 实验操作 （一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 称量 溶化 灭菌 倒平板 接种方法有： 平板划线法和稀释涂布平板法 计算 （二）纯化大肠杆菌 （二）、纯化大肠杆菌 平板划线法 稀释涂布平板法 平板分离 由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，就是菌落。 根霉 曲霉 青霉 将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环_______ 在_______旁冷却接种环，并打开棉塞 将试管口通过火焰 .将已______的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液 左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划__________条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基。 .将试管通过火焰，并塞上棉塞 火焰 冷却 三至五 灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的_______开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。 末端 烧红 将平板_____放入培养箱中培养。 倒置 平板划线接种 第一区域 第二区域 第三区域 第四区域 第五区域 2：每次划线前灼烧接种环的目的： 3：划线结束后灼烧接种环的目的： 答案：避免接种环上可能存在的微生物污染培养基 答案：杀死上次划线结束后残留的菌种 答案：及时杀死接种环上残留的菌种，避免污染环境和操作者。 1：第一步灼烧接种环的目的： 系列稀释操作 101 102 103 104 105 106 (1)将分别盛有9mL水的试管灭菌并编号。 (2)用移液管吸取1mL培养的菌液，注入第二支试管中，轻压橡皮头，吹吸三次使之充分混匀。 (3)从101倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注入第三支试管中，重复步骤2，直至到第六支试管。 （2）涂布平板操作 讨论 提示：应从操作的各个细节保证“无菌”。 例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸 管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒 精灯火焰周围；等等。 （一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 称量 溶化 灭菌 倒平板 接种方法有： 平板划线法和稀释涂布平板法 计算 （二）纯化大肠杆菌 （三）将接种后的培养基和一个未接种的 培养基放入37℃恒温箱中培养12h和24h后， 观察并记录 三 课题延伸 1.斜面保藏 临时保存 菌种的保藏 2.甘油保藏 长期保存 斜面保藏 练习 1.获得纯净培养物的关键是 A 将用于微生物培养的器皿，接种用具和 培养基等器具进行灭菌 B 接种纯种细菌 C 适宜环境条件下培养 D 防止外来杂菌的入侵 练习 1.获得纯净培养物的关键是 A 将用于微生物培养的器皿，接种用具和 培养基等器具进行灭菌 B 接种纯种细菌 C 适宜环境条件下培养 D 防止外来杂菌的入侵 练习 2.下列操作与无菌技术无关的是 A 接种前用肥皂洗双手,再用酒精擦拭双手 B 接种前用火焰烧灼接种针 C 培养在50℃左右时搁置斜面 D 在酒精灯的火焰旁完成 练习 2.下列操作与无菌技术无关的是 A 接种前用肥皂洗双手,再用酒