2015酶工程第2章节 酶的生产和纯化.pptVIP

生长偶联型 （同步/中期合成型） 部分生长偶联型 (滞后合成型) 非生长偶联型(延续合成型) 2.2.2.3. 发酵条件对产酶的影响 A. 细胞活化与扩大培养 B. 培养基 C. pH值 D. 温度 E. 溶解氧 A. 细胞活化与扩大培养 菌种保藏：短期保藏、长期保藏 菌种活化：使用前接种于新鲜培养基上，培养以恢复细胞生命活动能力 扩大培养： 为保证发酵时有足够数量的优质细胞，活化细胞要经一级至数级扩大培养 一般培养到细胞处于对数生长期为宜 采用孢子接种，则应培养至孢子成熟期 培养基的组成 碳源、氮源、水、无机盐、生长因子…… 根据微生物种类和生长条件确定培养基，同种细胞用于不同的酶生产，培养基成分不一样 生长、增殖、发酵、产酶等各阶段所需有区别 种子培养基和发酵培养基不一样 尽量减少培养基中对产酶的阻遏作用的物质 B. 培养基的影响 pH值对发酵产酶的影响 影响酶解离、电荷分布、构象和酶活、膜通透性、底物和产物的性质 改变酶之间的产量比例 产酶最适pH值：通常接近酶反应最适pH值，但一般不同于细胞生长的最适pH值 pH的变化：随细胞生长培养基pH会发生变化 pH的调控：培养基组分、比例、缓冲液、酸碱、补料 C. pH值的调节和控制 产酶温度 产酶温度往往低于生长温度 较低温度mRNA 稳定性较高，延续酶的合成 温度过低微生物代谢减慢，延长发酵周期 温度的变化 因细胞