显微镜的使用及微生物形态观察指导类型验证性学时.PDFVIP

《显微镜的使用及微生物形态观察》实验指导 《显微镜的使用及微生物形态观察》实验指导 《《显显微微镜镜的的使使用用及及微微生生物物形形态态观观察察》》实实验验指指导导 实验类型： 实验学时： 实验要求： 实验类型： 实验学时： 实验要求： 实实验验类类型型：：验证性 实实验验学学时时：：2 实实验验要要求求：：必做 一、实验目的 一、实验目的 一一、、实实验验目目的的 1.学习普通光学显微镜的使用方法。 2.了解普通光学显微镜的构造。 3.认识原生动物、菌胶团等废水处理过程中常见的微生物。 二、实验内容 二、实验内容 二二、、实实验验内内容容 了解显微镜的结构和各部分的作用，掌握显微镜使用和保护的方法，观察示范片即标本 上的微生物个体形态，学习绘制微生物形态图。 三、仪器设备 三、仪器设备 三三、、仪仪器器设设备备 光学显微镜 载玻片 盖玻片 四、所需耗材 四、所需耗材 四四、、所所需需耗耗材材 生物标本片 擦镜纸 二甲苯 香柏油等 五、实验原理、方法和手段 五、实验原理、方法和手段 五五、、实实验验原原理理、、方方法法和和手手段段 显微镜的结构见实验图-1。显微镜分机械装置和光学系统两部分。 1)机械装置 ①镜筒：镜筒上端装目镜，下端接转换器。镜筒有单筒和双筒两种。单筒有直立式(长度为 o 160mm)和后倾斜式(倾斜 45 )。双筒全是倾斜式的，其中一个装有屈光度调节装置，以备两眼视 力不同者调节使用。两筒之间可调距离，以适应两眼宽度不同者调节使用。 ②转换器：转换器装在镜筒的下方，其上有 4 个或 5 个孔。不同规格的物镜分别安装在 各孔上。 ③载物台：载物台为方形（多数）和圆形的平台，中央有一光孔，载物台上还有移动器（其上 有刻度标尺），可纵向和横向移动，移动器的作用是夹住和移动标本用。 ④镜臂：镜臂支撑镜筒、载物台、聚光器和调节器。 ⑤镜座：镜座为马蹄形，支撑整台显微镜，其上有反光镜。 ⑥调节器：调节器包括大、小螺旋调节器（调焦距）各一个。可调节物镜和所需观察的物体之 间的距离。调节器装在镜臂下方,通过升降载物台来调焦距。 2）光学系统及其光学原理 ①目镜：每台显微镜备有 3 个不同规格的目镜，例如 5 倍（5 ×）、10 倍（10×）和 15 倍 （15×），高级显微镜除了上述三种外，还有 20 倍（20×）的。 ②物镜：物镜装在转换器的孔上，物镜有低倍镜(4×、10×两种)、高倍镜(40×)及油镜(100 ×)三种。物镜的性能由数值孔径(Numerical Aperture,N．A．)决定。数值孔径= n×sin a/2， 其意为玻片和物镜之间的折射率乘上光线投射到物镜上的最大夹角的一半的正弦。 光线投射到物镜的角度越大，显微镜的效能越大，该角度的大小决定于物镜的直径和焦 距。n 是影响数值孔径的因素，空气的折射率 n = l，水的折射率 n = 1.33，香柏油的折 o 射率 n = l.52，用油镜时光线入射 a/2 为 60 ，则 sin 60 = 0.87。从实验图 - 2 可知： 以空气为介质时：N. A．= 1× 0.87=0.87 以水为介质时：N．A．＝ 1.33 ×0.87=1.16 以香柏油为介质时：N. A．＝ 1.52×0.87=l.32 显微镜的性能还依赖于物镜的分辨 率，分辨率即能分辨两点之间的最 小距离的能力。分辨率用δ表示，δ＝0.61 ×λ/N.A(λ为波长），分辨率与数值孔径成正 比，与波长成反比。增大数值孔径，缩短波长可提高显微镜的分辨率，使目的物的细微结 构更清晰可见。事实上可见光的波长（0.38－0.7μm）是不可能缩短的，只有靠增大数值 孔径来提高分辨率。 物镜上标有 N.A.等字样均有其特定含义，以油镜为例：N.A．1.25、100 ×、“OI