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DAN重组技术的基本工具

教学目标: 1、简述DAN重组技术所需三种基本工具 2、认同基因工程的诞生个发展离不开理论研究和技术创新 教学重点: DAN重组技术所需三种基本工具的作用 教学难点: 基因工程载体所需具备的条件 课堂测试 1、以下有关基因工程的叙述,正确的是() A、基因工程是细胞水平上的生物工程 B、基因工程的目的是人工合成自然界中不存在的新基因 C、基因工程产生的变异属于人工诱变 D、基因工程育种的优点之一是定向的使生物产生可遗传的变异 2、下列属于分子缝合针的是() ①E.Coli DAN连接酶 ②T4DAN连接酶 ③DAN聚合酶 ④解旋酶 ⑤RAN聚合酶 ⑥限制酶 A、①②③④ B ①②⑤⑥ C①② D③⑤ 3、下列不属于质粒被选为运载体的理由是() A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DAN分子 课堂测试 1、以下有关基因工程的叙述,正确的是(D) A、基因工程是细胞水平上的生物工程 B、基因工程的目的是人工合成自然界中不存在的新基因 C、基因工程产生的变异属于人工诱变 D、基因工程育种的优点之一是定向的使生物产生可遗传的变异 2、下列属于分子缝合针的是(C) ①E.Coli DAN连接酶 ②T4DAN连接酶 ③DAN聚合酶 ④解旋酶 ⑤RAN聚合酶 ⑥限制酶 A、①②③④ B ①②⑤⑥ C①② D③⑤ 3、下列不属于质粒被选为运载体的理由是(D) A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DAN分子 * * 专题1 基因工程 基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做DNA重组技术。 第1节 杨汉中学 王莉 问题探讨 手术刀 缝合针 运输工具 培育抗虫棉需要哪些基本工具? 来源 种类 作用 作用结果 阅读课本4-5页“限制性核酸内切酶——分子手术刀”的相关内容,填写下表 自主学习1 主要从原核生物中分离纯化而来 已经分离出大约4000种 1、识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列 2、使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 形成两种末端:黏性末端或平末端 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ 脱氧核苷酸的结构 G 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ 1’ 2’ 3’ 4’ 5’ A 3’,5’-磷酸二酯键 3’端 5’端 3’端 5’端 磷酸二酯键 * 仔细观察各限制酶 识别的特定序列有何 特点? 限制酶的识别序列 限制酶所识别的序列的特点是:呈现碱基互补对称,无论是6个碱基还是4个碱基,都可以找到一条中心轴线,中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的 ,称为回文序列 中轴线 在G与A之间切割 大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)只能识别GAATTC 序列,并在G和A之间切开。 EcoRI限制酶的作用   黏性末端     黏性末端 EcoRI限制酶的切割 被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。 SmaI只能识别CCCGGG序列,并在C和G之间切开。 中轴线 SmaI限制酶的作用 在G与C之间切割 平末端   平末端 SmaI限制酶的切割 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端。 你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是什么吗? 原核生物易受自然界外源DNA的入侵,但生物 在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机 制,以防止外来病原物的侵害。限制酶就是细 菌的一种防御性工具,当外源DNA侵入时,会 利用限制酶将外源DNA切割掉,以保证自身的 安全。所以,限制酶在原核生物中主要起到切 割外源DNA、使之失效,从而达到保护自身的 目的。 寻根问底 * 类型 来源 功能 相同点 差别 E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 大肠杆菌 T4噬菌体 恢复磷 酸二酯 键 只能连接黏性末端 能连接黏性末端和 平末端(效率较低) 阅读课本第5页“分子缝合针”——DNA连接酶的相关内容,填写下表 自主学习2 把切下来的DNA片段拼接成新的DNA,即将脱氧核糖和磷酸连接起来催化形成磷酸二酯键 DNA连接酶的作用 两DNA片段要具有互补的黏性末端才能拼起来 DNA连接酶的缝合作

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