药学中的生物相关技术和方法2015-1-基因工程和干细胞相关技术.ppt

IV-Gene and stem cell technology;Gene technology;Gene clone;Gene library;Tools for gene clone;PCR (Polymerase Chain Reaction);cDNA合成与RT-PCR;;Screening the genomic library of trypanosoma cruzi;DNA analysis II: 实时荧光定量PCR技术（Real Time PCR）;DNA测序: 基因分析的终极技术;第一代：Sanger法（DNA双脱氧链终止法---末端距离分析法）;第二代：合成测序法-高通量测序（碱基时序法）;左起：谢晓亮、乔杰、闫丽盈、汤富酬;2代半： Single-molecule real-time (SMRT) sequencing technology 单分子实时测序技术;;蛋白质分析技术和蛋白组学;基因导入系统;脂质体转染法;慢病毒转染法;植物细胞的基因转染;基因编辑方法;PCR基因点突变技术;RNAi基因沉默法;实用中的shRNA基因沉默技术;CRISPR(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats)/Cas9基因编辑技术;报告基因技术I：荧光蛋白标签;报告基因技术II：信号转导检测;Biotech. for Stem cells; 干细胞具有自我更新和多能分化能力， 主要包括胚胎干细胞(ES) 、间充质干细胞(MS)和诱导多能干细胞(iPS)等 iPS由于其在疾病模型及再生医学中的应用能力与胚胎干细胞类似，且不存在伦理问题，逐渐成为这一领域的新星。;干细胞的诱导分化;山中伸弥（Shinya Yamanaka），毕业于大阪市立大学。2006年首次利用4个转录因子Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4将小鼠成纤维细胞重编程为胚胎干细胞样的多能干细胞，并验证了其具有与胚胎干细胞类似的多元分化能力和自我更新能力，从而建立小鼠诱导多能干细胞系。2012年，山中伸弥获得诺贝尔生理或医学奖。 ;iPS：方法和问题;干细胞技术和药物开发-I：干细胞用于药物筛选和临床前评价;干细胞技术和药物开发-II：病人干细胞;干细胞和药物开发-III：肿瘤干细胞（CSC/TSC）;肿瘤干细胞（CSC/TSC）的特征;肿瘤干细胞靶向治疗的思路;思考题