第二十五章肠道病毒.ppt

五、微生物检验 1.采集病人发病早期咽洗液和粪便，离 心取上清，加抗生素后保存于4℃。 2.可用ELISA法检测标本中特异性抗原， 核酸杂交检测病毒核酸。 3.病毒分离和鉴定 用人胚肾、猴肾细胞和Hela等细胞分离病 毒，病毒在细胞内增殖迅速，于24～48h可 出现典型CPE，细胞圆缩堆积、坏死脱落为 阳性，保存于4℃待鉴定。用标准抗血清和 分型血清进行中和试验，确定病毒及分型。 用免疫荧光技术鉴定，可于2-3天内作出诊 断，比中和试验快1周。 4．抗体检验 用双份血清进行中和试验或 ELISA法检测病人血清抗体效价， 若有4倍增长则有诊断意义。 微生物检验 1．标本采集 病程早期粪便和咽拭 于，引起脑膜炎的病人取脑脊液等。 2. 标本检查 核酸检测PCR法是用于 诊断胞内病毒感染的最新技术。 以病毒5ˊ端非编码区核苷酸序列 设计引物，通过RT-PCR扩增肠道 病毒RNA,通过核酸电泳或Southern 印迹转移杂交技术。 4．病毒分离 需原代或传代猴肾细胞或人源培 养细胞,如二倍体细胞，根据出 现CPE情况收集病毒液。鉴定依 靠中和试验、HI试验。进行型别 鉴定的组合血清共有8个组,可 对肠道病毒42个型别进行鉴定。