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生化试验第11周碱性磷酸酶米氏常数的测定
院
实验十四 碱性磷酸酶米氏
学
学
常数的测定
科
命
生
学
大
门
厦
一、目的要求
1.学习分光光度法测定的原理和方法
院
学
2.学习和掌握米氏常数(K )及最大反应速度
学
m
科
(Vm )的测定原理和方法,测出碱性磷酸酶
命
在以对硝基苯酚磷酸为底物时的K 和V 值。
生 m m
学
大
门
厦
二、原理
酶促反应v-[S]曲线
院
学
学
科
命
生
学
大
门
推导出米氏方程为: V [S ]
厦 v m
K m [S ]
其中[S]为底物浓度;v为初速度;V 为最大反应速度;
m
Km 为米氏常数
动力学参数的测定
v 院
学 V [S]
V
V max max
max
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