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基因工程第九章外源基因在哺乳动物中表达
第九章外源基因在哺乳
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动物中表达
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n HAT选择要求受体细胞必须是TK-,这是其缺陷所
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在。至今最常用的TK-细胞是小鼠L细胞TK-突变
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株(L细胞是一种成纤维细胞)。也可以用实验手段
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使其它细胞变成TK-细胞。
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CHO(chinese hamster ovary cell)
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n 通常用的CHO细胞是DHFR基因缺陷型的细胞,
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其特点:
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n 当扩增的基因整合到宿主染色体上时,即使无选择压力时
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,也能稳定遗传。
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n 适用于多种蛋白质的分泌表达和胞内表达。
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n 对培养基的适应性强,也可以用无血清培养基培养。
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n CHO细胞可进行贴壁培养,也可进行悬液培养。
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n 可大量培养,进行规模生产,培养量可放大到5000L
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n 对其DNA顺序也进行了全序列分析。加上对SV40的复
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制和转录的研究,为发展SV40载体奠定了基础。
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n SV40对不同种的细胞有不同的感染效应。SV40对猿
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