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实验中医学生物化学方法及其在中医研究中的应用
* (三)肝和肝虚证 1.肝血虚证与能量代谢 2.肝气虚证与物质代谢 3.肝与神经内分泌 * (四)脾虚证 1.脾虚与物质代谢 脾虚患者唾液淀粉酶活性下降、血清胃泌素和胰淀粉酶活性低下,胃肠蠕动紊乱,小肠吸收功能低下。脾虚患者木糖排泄率显著降低。 检测了血清必需脂肪酸、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量、丙二醛(MDA)含量。 血清游离氨基酸(FAA)、必需氨基酸、支链氨基酸明显降低,缬、甘、苏、色、异亮、丝、丙、组氨酸等8种氨基酸含量也明显降低。头发锌,家兔骨骼肌中钾、钠、铜的含量。 * 2.脾虚证与能量代谢 脾气虚患者肌纤维的肌酸磷酸激酶(CPK)、琥珀酸脱氢酶、辅酶1-四氮唑还原酶(NADH-TR)活性、肌球蛋白腺苷三磷酸酶(M-ATPase)活性,以及肌糖原含量均减少,线粒体发生改变,骨骼肌有氧氧化效率降低,糖酵解供能途径障碍,能量代谢受阻;红细胞膜Na+-K+-ATPase活性等降低。 3.脾虚证与神经内分泌 脾气虚证患者乙酰胆碱水平明显升高、胆碱酯酶活性明显下降;还检测了患者血、尿PGE2 、PGF2α含量,血清T3水平等。 * (五)肺虚证 1.肺虚与物质代谢 肺气虚患者抗氧化能力和红细胞免疫力下降。 2.肺虚证与神经内分泌 (六)肾虚与物质代谢 1.肾虚与物质代谢 2.肾虚证与神经内分泌 (1)下丘脑-垂体-性腺轴与肾虚。 (2)下丘脑-垂体-肾上腺轴与肾虚。 (3)下丘脑-垂体-甲状腺轴与肾虚。 * (七)体质学说 1.体质学说与物质代谢 2.体质学说与能量代谢 * 三、展望 现代化的生物化学技术应用于中医药的研究,不仅会促进中医药的发展,也同时会促进生物化学的进展。 中医药的发展需要生物化学,所以中医院校的学生除系统学习中医知识外,还要学好生物化学和现代医学的检测手段,运用生物化学方法进一步阐明中医理论的精髓。只有这样,才能发挥中医优势,促进自身的发展,促进中医药事业的发展! * 4.高效液相技术 什么是高效液相技术? 高效液相(HPLC)技术是液相层析微量、高效化的发展。HPLC是一种高效的液相层析技术,具有高速、高压、高效、高灵敏度等特点。依据样品的性质可选择不同的色谱柱、洗脱条件、检测器(紫外、荧光、电化学、示差等),还可将被检测物流出液分类收集。 * 上图:高效液相仪 右上图:高效液相结果 左下图:色谱柱 * (四)电泳技术 电泳的原理是什么? 带电颗粒在电场作用下,向着其电性相反方向移动的现象称为电泳。由于被分离物质各自的带电性、带电量、分子颗粒大小和形状等的不同,在同一电场下它们的移动速度各异,经过一定时间电泳后可被分离开来。 在电泳过程中,带电颗粒的迁移率在一定条件下与其所带电量、颗粒半径和溶液的黏度相关。此外还有以下因素可以影响物质的电泳迁移率:电场强度、溶液的pH值、溶液的离子强度、电渗作用等。 * 1.区带电泳 所谓区带电泳是指在电场作用下,被分离的各组分在支持物上相互分离为不同的区带。分类如下: (1)按支持物的物理性状不同可分为:① 凝胶电泳,该电泳方法使用最为普遍;② 滤纸及其他纤维纸电泳;③ 粉末电泳;④ 缘线电泳。 * (2)按支持物的装置形式不同可分为:① 平板式电泳;② 垂直板式电泳;③ 柱式电泳;④ 连续液动电泳。 (3)按pH的连续性不同可分为:① 连续pH电泳;② 非连续pH电泳。 * 左上:电泳结果 左下:垂直电泳架 右:双向电泳结果 * 凝胶成像系统 * 2.高效毛细管电泳(High Performance Capillary Electrophoresis,HPCE) 高效毛细管电泳与普通凝胶电泳的区别在哪? HPCE是离子或荷电粒子以高压电场为驱动力,在毛细管中按其淌度或/和分配系数不同进行高效、快速分离的一种电泳技术。它具有高效(每米理论塔板数在105以上)、快速(分离时间一般小于30min)、进样体积小(一般为nl级)、灵敏度高、溶剂消耗少和抗污染能力强等特点。应用范围包括无机离子、有机分子、生物大分子如糖、核酸、多肽和蛋白质等的分析。 * 不同型号的毛细管电泳仪及其工作原理 * (五)光谱技术 什么是光谱技术? 光谱技术是利用各种化学物质所具有的发射、吸收或散射辅射能的特性,对物质进行定性或定量的一类分析技术。它具有
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