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水产生物综合实验指导 尹 玲 刘 群 编著 日照职业技术学院水产系 第一部分 基础实验 实验1 显微镜的结构和使用 一、目的与内容 （一）目的： 初步了解显微镜的基本构造，能够规范和较熟练地使用。 （二）内容： 1、显微镜的各部分构造，并理解其基本性能。 2、通过观察装片，掌握显微镜的使用方法。 二、材料与用品 1、材料 生物玻片标本。 2、用品 显微镜、擦镜纸。 三、操作与观察 （一）显微镜的构造 普通光学显微镜是由机械系统、光学系统及光源系统3部分组成。此处以介绍双筒显微镜为主（图1－1）。 图1—1 光学显微镜的构造 1．机械系统 主要对光学系统和光源系统起支持和调节作用。它包括： （1）镜座与镜柱 镜座是显微镜底部的承重部分，可降低显微镜重心，使之不致倾倒。其后方有一直立的短柱称为镜柱，它支持着镜台。 （2）镜臂与镜筒 镜臂是镜柱以上的一个斜柄，便于手把握。镜臂的顶端安装有镜筒和镜头转换器。镜筒是镜臂前端的两个圆筒，其内安装目镜镜头。由物镜到目镜的光线便由此通过。调节左右镜筒之间的水平距离，以适应观察者两眼的眼间距，可使左右目镜的视野完全重合。 （3）镜台与标本移动器 镜台亦称载物台，是放置玻片标本的平台。其中央有一圆孔，称通光孔，来自下方的光线可由此进入物镜。镜台上装有标本移动器（或称推进尺），标本移动器上的压片夹用以固定载玻片，镜台右下方有标本移动器调节螺旋，转动螺旋可前后左右移动玻片标本。标本移动器上还带有标尺，可利用标尺上的刻度寻找和记录所观察标本的位置。 （4）镜头转换器 是镜筒下端一个可旋转的圆盘，其上可装置数个物镜镜头，转动转换器可换用不同倍数的物镜。 （5）调焦螺旋 位于镜柱的左右两侧，有粗、细两个调焦螺旋，能使镜台升降，以调节物镜与所观察标本之间的距离，获得清晰的图像。粗、细调焦螺旋组合在一起，外周粗的螺旋为粗调焦螺旋，其升降距离较大，主要用于寻找目的物。用低倍镜观察标本时，用粗调焦螺旋调焦距。粗调焦螺旋中央、周径较小的是细调焦螺旋，其升降距离较小，能精确地对准焦点，获得更清晰的物像。 2．光学系统 亦即成像系统，分别由目镜和物镜构成。 （1）目镜 安装在镜筒上端，其结构是在一个金属圆筒上端装有一块较小的透镜、下端内侧装有一块较大的透镜，其作用是将物镜所放大了的物像进行再放大。每台显微镜常备有几个倍数不同的目镜，每个目镜上分别标有5×、10×、12.5×等放大倍数。 （2）物镜 由数组透镜组成，可放大物体。透镜的直径越小，放大的倍数越高，每台显微镜均备有几个倍数不同的物镜，放大40×以下的为低倍镜，一般有4×、10×；放大40×以上的为高倍镜，放大100×以上的为油镜。★如何计算显微镜的放大倍数？物镜是显微镜获得物像的主要部件，其作用为聚集来自光源的光线和利用入射光对被观察的物体做第一次放大。 3．光源系统 由光源、聚光器和可变光阑构成。 （1）内光源或反光镜 在通光孔正下方的镜座上有一个内置式电光源，镜座的后侧有电源开关，左侧或右侧有光量调节器，用以调节光线的强弱。旧式显微镜采用外光源，在镜台孔正下方的镜座上有一反光镜，它为一圆形的平、凹双面镜，接受外来光线并将光线反射到聚光器。平面镜反光较弱，用于光线较强的情况；凹面镜反光较强，用于光线较弱的情况。反光镜的方向可以任意转动调节，以选择适合的角度收集来自任何方向的光线。 （2）聚光器 在通光孔下方，由2—3块凸透镜组成。作用是聚集来自下方的光线，使光线增强，通过通光孔射入标本上，并使整个物镜的视野均匀受光，以提高物镜的分辨力。 （3）可变光阑 位于聚光器下面，由许多金属片组成。推动操纵光圈的调节杆，就可调节光圈的大小，使上行的光线强弱适宜，便于观察。 （二）显微镜的使用方法 （1）安放显微镜 打开镜箱，右手紧握镜臂，左手平托镜座，轻放桌上距离桌子边缘几厘米处，让目镜对着观察者。 （2）检查 检查各部件是否完好，镜身、镜头必须清洁。 （3）对光 配置内置式电光源的显微镜可直接打开电源开关，并调节光量，使视野内的亮度达到明暗适宜，同时打开光圈。旧式显微镜应首先将可变光阑的孔径调至最大，将聚光器升至最高点，再将低倍镜对准通光孔，镜头离载物台约1cm。这时，把反光镜转向光源，直到视野中的光线既明亮又均匀时为止。在镜检全过程中，根据所需光线的强弱，还可通过扩大或缩小光圈、升降聚光器加以调节。 （4）调焦 光线对好后，将玻片标本放在镜台上，有盖玻片的一面朝上，被检物体对准镜台孔正中，用标本移动器上的压片夹卡紧，然后调焦。转动粗调焦螺旋调节镜台与物镜间的距离，从侧面注视，以二者间距离5mm为度。然后自目镜观察，慢慢转动粗调焦螺旋，同时移动标本移动器，直到基本看清标本物像。 （5）低倍镜观察 用粗调焦螺旋调