牡丹SERK2基因的克隆和花芽休眠进程中细胞分裂频率分析-园艺学报.PDFVIP

园艺学报，2018 ，45 (3) ：511 –518. Acta Horticulturae Sinica doi ：10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0387；http ：//www. ahs. ac. cn 511 牡丹 SERK2 基因的克隆和花芽休眠进程中细胞 分裂频率分析 高学凯，张玉喜，刘春英，窦宝磊，盖树鹏* （青岛农业大学生命科学学院，山东省高校植物生物技术重点实验室，山东青岛 266109 ） 摘 要：根据牡丹休眠相关的差减文库中筛选得到的类体细胞胚胎发生受体蛋白激酶基因 SERK2 的 部分 cDNA 片段，采用 RACE 技术扩增到 5′和 3′ cDNA 片段，通过拼接得到 PsSERK2 基因 2 374 bp 的全 长 cDNA 序列，其中 5′非编码区（UTR ）为 158 bp，3′UTR 为 341 bp，ORF 为 1 875 bp，编码 625 个氨 基酸。同源性分析得出其与葡萄 VvSERK2 蛋白同源性最高，为 92.95% 。PsSERK2 在初花期（大风铃期） 茎中表达量最高，叶片中最低。Northern 杂交和定量 PCR 结果均表明 PsSERK2 在低温解除牡丹花芽休眠 前期上调表达，而后降低。低温累积过程中，花芽内各个组织细胞分裂频率逐渐增加。推测 PsSERK2 上 调表达促进了休眠花芽的发育，进而促进内休眠的解除。 关键词：牡丹；PsSERK2 ；RACE ；基因表达；分裂频率 中图分类号：S 685.11 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2018 ）03-0511-08 Cloning of Somatic Embryogenesis Receptor-like Kinase Gene PsSERK2 and Cell Division Rate Analysis During Dormancy Release in Tree Peony （Paeonia suffruticosa ） * GAO Xuekai，ZHANG Yuxi ，LIU Chunying ，DOU Baolei ，and GAI Shupeng （College of Life Sciences，Qingdao Agricultural University，Key Lab of Plant Biotechnology in Universities of Shandong Province ，Qingdao，Shandong 266109 ，China） Abstract ：According to the partial sequences of potential SERK2 gene screened from suppression subtractive hybridization library，two specific primers were designed and used for 5′ and 3′ RACE amplification in this experiment. A 2 374 bp full length cDNA sequence was obtained with 158 bp 5′ untranslated region （UTR ），341 bp 3′ UTR ，and contained a complete ORF with 1 875 bp encoding 625 amino acids. The highest homology with PsSERK2 was VvSERK2 in Vitis vinifera with 92.95% similarity. The results of real-time PCR indicated that the highest expression level of PsSERK2 was detected in the