原位核酸分子杂交技术-生物探索.PDFVIP

原位核酸分子杂交技术  原位核酸分子杂交技术简称原位杂交(in situ hybridization ISH)是应用已知碱基顺序并带有标记 物的核酸探针与组织、细胞中待检测的核酸按碱基配对的原则进行特异性结合而形成杂交体，然后再 应用与标记物相应的检测系统，通过组织化学或免疫组织化学方法在被检测的核酸原位形成带颜色的 杂交信号，在显微镜或电子显微镜下进行细胞内定位。这一技术为研究单一细胞中DNA 和编码各种蛋 白质、多肽的相应mRNA 的定位提供了手段，使从分子水平研究细胞内基因表达及有关基因调控提供了 有效的工具。可视为组织化学或免疫细胞化学中革命性的突破。原位杂交技术已应用于基础研究如基 因组图(Gene mapping),转基因检测,基因表达定位(localization of gene expression),核DNA 和RNA 的 mRNA 的排列和运输(arrangement and transport of mNA),复制(replication)和细胞的分类 (Sorting of cells)。临床研究应用在细胞遗传学(Cytogenetics),产前诊断(Prenatal diagnosis), 肿瘤和传染性疾病的诊断,生物学剂量测定(biological dosimetry)和病