基于宿主肠道菌群作用的益生乳酸菌精准筛选及产业化.doc

项目名称：基于宿主肠道菌群作用的益生乳酸菌精准筛选及产业化关键技术 一、推荐单位意见 该项目采用宏基因组学研究手段，明确了中国不同民族健康人群、奶牛和肉鸡肠道微生物特征，发明了基于肠道微生物作用的益生乳酸菌精准筛选技术，获得适合中国人群健康、奶牛健康养殖和肉鸡绿色养殖的益生乳酸菌17株，解决了益生乳酸菌的精准筛选技术落后和优良菌株匮乏的难题。发明了益生菌乳酸菌高密度发酵技术，突破了我国益生乳酸菌高密度发酵的技术瓶颈，菌体生物量提高了1个数量级，解决了我国益生乳酸菌高密度发酵的技术瓶颈。发明了益生乳酸菌冷冻干燥的高效保护剂，解决了冷冻干燥过程中菌体存活率低的技术难题，活菌得率提高了30个百分点，解决了冷冻干燥过程中菌体存活率低的技术难题。新分离、保藏乳酸菌4,933株，明确了乳酸菌物种分化伴随的功能基因进化历程，丰富了我国最大的乳酸菌遗传种质资源库。开发了益生乳酸菌制剂、发酵乳生产用菌株、奶牛健康养殖和肉鸡绿色养殖微生态制剂4个系列产品，推广应用于多家企业，取得了显著的经济、社会和生态效益。 项目取得发明专利36件，发表论文被SCI收录134篇；出版专著2部，获2009年度内蒙古自治区自然科学一等奖、2012年度内蒙古自治区科技进步一等奖。 同意推荐该项目2017年度国家技术发明二等奖。 二、项目简介 我国益生乳酸菌产业正呈快速发展态势，年平均增速达20%，但由于我国益生乳酸菌资源与筛选技术匮乏、高密度发酵和冷冻干燥技术落后，所采用的菌种、制剂与关键技术主要依赖进口，严重制约该产业的可持续发展。该项目针对上述难题，发明了基于肠道微生物特征的益生乳酸菌精准筛选技术，突破了乳酸菌高密度发酵、高活性冷冻干燥关键技术，打破国外产品和技术壁垒，实现了益生乳酸菌制剂的产业化。 1．发明了基于肠道微生物作用的益生乳酸菌精准筛选技术，解决了益生乳酸菌的精准筛选技术落后和优良菌株匮乏的难题。采用宏基因组学研究手段，明确了中国不同民族健康人群、奶牛和肉鸡肠道微生物特征，发明了基于肠道微生物作用的益生乳酸菌精准筛选技术，获得适合中国人群的益生乳酸菌4株、奶牛健康养殖的益生乳酸菌9株、肉鸡绿色养殖的益生乳酸菌4株，解决了益生乳酸菌的精准筛选技术落后和优良菌株匮乏的难题。 2. 发明了益生菌乳酸菌高密度发酵技术，突破了我国益生乳酸菌高密度发酵的技术瓶颈，菌体生物量提高了1个数量级。基于基因组和蛋白质组研究，明晰了菌株不同生长阶段营养需求，针对菌株营养缺陷，发明了益生菌乳酸菌高密度发酵技术，高密度发酵液活菌数由1.0×109CFU/mL提高到1.2-2.0×1010CFU/mL，解决了我国益生乳酸菌高密度发酵的技术瓶颈。 3. 发明了益生乳酸菌冷冻干燥的高效保护剂，解决了冷冻干燥过程中菌体存活率低的技术难题，活菌得率提高了30个百分点。从转录组水平上发现了细胞膜氧化损伤导致益生乳酸菌冷冻干燥过程中菌体衰亡的机理，发明了益生乳酸菌冷冻干燥的微包膜高效保护剂，使冷冻干燥过程中活菌得率由原来的60%提高至90%，生产出的发酵剂（制剂）活菌数达2.0-10.0×1011 CFU/g，解决了冷冻干燥过程中菌体存活率低的技术难题。 该项目新分离、保藏乳酸菌4,933株，进一步明确了乳酸菌物种分化伴随的功能基因进化历程，丰富了我国最大的乳酸菌遗传种质资源库。产品在内蒙古伊利实业集团股份有限公司、旗帜婴儿乳品股份有限公司、内蒙古北方联牛农牧业股份有限公司等企业推广应用，取得了显著的经济、社会和生态效益。项目取得发明专利36件，发表论文被SCI收录134篇；出版专著2部，获2009年度内蒙古自治区自然科学一等奖、2012年度内蒙古自治区科技进步一等奖。 三、客观评价 1.科技部认定的第三方机构评价意见认为项目整体技术处于国际先进水平，其中高活性冷冻干燥技术达到国际领先水平。 中国农学会组织专家组对本项目的成果进行评价，专家组一致认为“该成果针对我国益生乳酸菌资源与筛选技术匮乏、高密度发酵和冷冻干燥技术落后的难题，丰富了益生乳酸菌遗传种质资源库，发明了基于肠道微生物特征的益生乳酸菌精准筛选技术，攻克乳酸菌高密度发酵、高活性冷冻干燥关键技术，成功实现了益生乳酸菌制剂的产业化，取得显著成效。” 2.查新报告结论表明项目中适合中国人群生理特性益生乳酸菌产品的产业化未见报道。 委托内蒙古自治区科技信息研究院科技查新中心对本成果进行了科技查新，“基于宿主肠道菌群作用的益生乳酸菌精准筛选及产业化关键技术”的查新报告结论：1）关于乳酸菌资源库的建设，国内虽有文献报道，但在资源库建设规模方面与该项目相去甚远，国外乳酸菌资源库无相关报道。2）关于具有自主知识产权的、适合中国人群生理特性益生乳酸菌产品的产业化未见报道，除该委托方发表的文献外，在国内外公开发表的文献中未见相关报道；3）开发的发酵剂