实验6-PGS.ppt

实验五 生长素、ABA等植物激素的部位和浓度效应——植物激素对根芽生长的影响 实验原理 植物激素生理效应的特异性 Auxin及人工合成的类似物质如萘乙酸(NAA)等对植物生长的调节作用， ABA抑制生长和种子萌发 Auxin的剂量效应 在不同浓度下对植物生长的效应也不同。一般来说，低浓度的Auxin促进生长，高浓度时则抑制生长。 Auxin不同器官的敏感性差异 不同的植物器官对Auxin的反应也不同，通常根比芽、茎对Auxin更敏感。 材料、设备仪器及试剂 生长素实验 材料：小麦种子 仪器：温箱、培养皿、移液管、直尺、滤纸、镊子、铅笔 药品：10 mg/L NAA， ABA实验 材料：油菜种子 仪器：培养皿、滤纸、镊子、移液管、铅笔、烧杯 药品：ABA 母液（ 0.1 mM ABA ） 实验步骤 1. 配置浓度梯度：取洁净大皿5套，编号。在1号皿中加入10mgNAA/L 1.2mL，加10.8 mL蒸馏水混匀后即成为1 mg/L 萘乙酸溶液。从第1号皿中吸取1.2mL放入2号皿中，加10.8mL蒸馏水混匀后即成为0.1 mg/L 萘乙酸溶液。如此依次稀释到4号皿（最后从第4号培养皿中取出1.2mL弃)，5号皿则加入10.8mL蒸馏水作对照。 2. 排种子：在各皿中放入一张与皿底大小一致的滤纸，选取一致的小麦种子10粒，用镊子将其整齐地排在皿直径上，使芽尖朝上并使胚的部位朝向同一侧，盖上皿盖后，放在25℃的温箱中暗培养3d。 1. 取洁净小皿5套，编号。在1号培养皿中加入ABA母液（0.1 mM）2 mL，然后从其中吸取0.2 mL放入2号培养皿中，加1.8 mL蒸馏水混匀后即成为0.01 mM 。如此依次稀释到4号皿（最后从第4号皿中取0.2 mL弃去），第5号皿中则加入1.8 mL蒸馏水作对照 2. 排种子：在各皿中放入一张与皿底大小一致的滤纸，选取油菜籽20粒，放入皿中后用镊子种子分布均匀，盖上皿盖后，放在25℃的温箱中暗培养3d。 结果记录与分析 分析: NAA浓度效应 器官对NAA的敏感性 对数据作统计分析(修过生物统计课程的) 结果记录与分析 ABA实验(培养2d后观测) 调查发芽率：胚芽（根）种子半径（露白） 作图: 将ABA 浓度转换为对数作横座标，以相对发芽率（设对照发芽率为100%）为纵座标。 分析不同浓度的ABA对种子发芽率的影响. 注意事项 洁净的培养皿 选用活力一致的种子 制作浓度梯度时,摇匀后再取,由高到低稀释 平铺吸水纸 实际试验时务必设置重复 携带调查用直尺\纸笔 调查后洗净培养皿\反置 思考题 如何准备ABA母液? * * 1．了解Auxin / ABA的生理效应； 2. 了解不同器官对植物激素敏感性的差异 3. 综合分析 不同浓度的生长素对根部的影响 10-11 10-9 10-7 10-5 10-3 10-1 Auxin浓度 不同营养器官对不同浓度IAA的反应 10-4 根 茎 芽 10-10 10-8 ABA对种子的萌发抑制作用 ABA对气孔的影响 1 .2ml NAA母液 9 ml H2O 1 ml ① 1 ml ② 1 ml ③ 舍弃1 ml④ 9 ml H2O 1 mg/L 0.1 mg/L 0.01 mg/L 0.001 mg/L 0 mg/L ① ② ③ ④ ⑤ 2 ml ABA母液 1.8 ml H2O 0.1 mM ① ② ③ ④ ⑤ 1.8 ml H2O 0.2 ml ① 0.2 ml ② 0.2 ml ③ 舍弃0.2 ml ④ 0.01 mM 0.001 mM 0.0001 mM 0 mM 幼根增或减 芽长(平均值±SE) ( mg/L ) NAA浓度 培养2d后 0.001 根数(平均值±SE) 根长(平均值±SE) ? ? ? ? ? ? 幼芽增或减 0(CK) 0.01 0.1 1 调查 生长素实验