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酶工程复习题.doc.doc

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酶工程复习题.doc

酶工程复习题 一、填空题(1‘×20) 1、 戊二醛 , 二氨基丁烷 , 乙二氨 是酶分子修饰中分子内交联最常用的交联剂。 2、固定化对酶反应系统的影响主要有: 酶构象改变 , 立体屏蔽 , 微扰效应 , 分配效应 , 扩散限制 。 3、根据酶催化的反应性质可以将酶分为: 氧化还原酶 , 转移酶 , 水解酶 , 裂解酶 , 异构酶 , 合成酶 6大类。 4、1961年,国际酶委会规定的酶活力单位为:在特定的条件下(25oC,PH及底物浓度为最适宜) 1min内 ,催化 1umol 的底物转化为产物的 酶量 为一个国际单位,即1IU。 5、1960年,查柯柏(Jacob)和莫洛德(Monod)提出了操纵子学说,认为DNA分子中,与酶生物合成有关的基因有四种,即操纵基因、调节基因、 启动 基因和 结构 基因。 6、SDS是利用蛋白的 分子量不同 进行分离,离子交换层析是利用蛋白的 静电吸附能力不同 进行分离。 7、酶活力的测定方法可用 终点 法, 动力学 法, 酶偶联测定 法和 电化学 法。 8、决定酶催化活性的因素有两个方面,一是 酶的结构 ?,二是 反应条件 。???????? 9、求Km最常用的方法是 双倒数作图法 。 10、可逆抑制作用可分为 非竞争性抑制作用 , 反竞争性抑制作用 , 争性抑制作用 。 11、酶活力的测定方法可用 终止 反应法和 连续 反应法。 12、通常酶的固定化方法有 吸附 法, 载体偶联 法, 交联 法, 包埋 ?法。 13、酶分子的体外改造包括酶的 表面 修饰和 内部 修饰。 14、模拟酶的两种类型是 全合成 酶和 半合成 酶 。 15、抗体酶的制备方法有 细胞融合 法, 抗体结合位点化学修饰 法,用生物工程方法产生抗体 法,引入辅助因子 法和?拷贝法。 16、根据酶和蛋白质在稳定性上的差异而建立的纯化方法有 选择性热交性 法, 选择性酸碱交性 法和 选择性表面 法。 17、酶的生产方法有 提取法 , 发酵法 , 化学合成法 。 18、日本称为“酵素”的东西,中文称为 酶 ,英文则为 Enzyme ,是库尼(Kuhne)于1878年首先使用的。其实它存在于生物体的 细胞内 与 细胞外 。 19、酶分子修饰的主要目的是改进酶的性能,即提高酶的 活力 、减少 酶的抗原性 ,增加 稳定性 。 20、借助 多功能或多功能试剂 使 微生物与微生物之间 发生交联作用,制成网状结构的固定化酶的方法称为交联法。 21、酶的分离纯化方法中,根据目的酶与杂质分子大小差别有 胶过滤 法, 超速离心 法和 超滤 法三种。 22、由于各种分子形成结晶条件的不同,也由于变性的蛋白质和酶不能形成结晶,因此酶结晶既是 一种酶是否纯净的标志 ,也是 一种酶和杂蛋白分离纯化的平段 。 二、名词解释(3‘×7) 1、酶的定向固定化:由于酶蛋白多点附着在载体上,从而引起了固定化酶蛋白无序的定向和结构变形的增加。另外,当酶随意固定化在载体上时一般是发生多位点的结合,这样就会降低酶的固定化量。如果通过不同的方法,把酶和载体在酶的特定点上连接起来,使酶在载体表面按一定得方向排列,使它的活性位点面朝固体表面的外侧排列,就有利于底物进入到酶的活性位点里去,从而显著提高固定化酶的活性,通过这样提高固定化酶的活性的方法叫酶的定向固定化。 2、模拟酶:利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。 3、抗体酶:通过改变抗体中与抗原结合的微环境,并在适当的部位引入相应的催化基团,所产生的具有催化活性的抗体。可由两种途径获得抗体酶:①采用过渡态的底物类似物诱导;②在现有的抗体基础上,通过化学修饰或通过蛋白质工程向其配体结合部位导入催化基团。 4、酶的抽提:是把酶从生物组织或细胞中以溶解状态释放出来的过程,以供进一步从中分离纯化出来所需要的酶。 5、分子印迹:是把酶从生物组织或细胞中以溶解状态释放出来的过程,以供进一步从中分离纯化出来所需要的酶。 6、离子交换层析:利用离子交换剂上的可交换离子与周围介质中被分离的各种离子间的亲和力不同,经过交换平衡达到分离的目的的一种柱层析法。 7、生物工程酶:是由活细胞产生的具有催化作用的有机物,大部分为蛋白质,也有极少部分为RNA。 8、膜型反应器:膜生物反应器一种由膜分离单元与生物处理单元相结合的新型水处理技术。而生物膜反应器是在反应器中添加各种填料以便微生物附着生长使在填料上形成了一层生物构成的类似于膜的结构,这样的反应器才被称为生物膜反应器。 9、酶工程:简而言之,酶工程就

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