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专业实习报告食品保健系
班級:四食四甲 姓名:甘晉宇 學號:9613020204 實習地點:海洋大學食品科學系 實習日期:99年1月20號~99年2月11號 大綱 實驗室簡介 指導老師、學長姐介紹 實習日誌 工作內容 實習成果 實習心得 實驗室簡介 海藻綠能產業 – 海藻農場發展效益評估 -- 海藻多醣生質乙醇與丁醇生產海藻 海藻寡醣生理活性研發 – 抗JEV , 腸病毒等 -- 抗凝血 , 抗血栓 自藻類製備新型食品: 以特定酵素水解藻類多醣(單醣可產熱量),加入藻類來源蛋白質,經乳酸菌發酵製成可在室溫下長期保存的即食食品 藻類多醣分解酵素的分離,純化,與轉殖整合 Agarases(16);Amylases(20);Xylanases(7);Alginate lyases(5) 產細菌素與產胞外黏性物質乳酸菌之發酵應用 近期研究主題 指導老師 潘崇良 現職 國立海洋大學食品科學系教授 學歷 美國康乃爾大學食品科學研究所博士 行政經歷 系主任、進修推廣部主任、圖書館館長 專長 微生物學、食品生物技術 指導學長姐 潘彥齊學長 陳柏璇學姐 實習日誌 January Mon Tue Wed Thu Fri 20 1.大掃除 21 1.大掃除 22 1.大掃除 2.配藥 25 1.配固態培養基 (MA) 2.配液態培養基 (MB) 26 1.活化菌株 (一活) 27 1.接種致液態培 養基(MB) 2.配製基質 3.測定酵素活性 28 1.接種至液態培 養基(MMB) 2.收集粗酵素液 29 1.保存菌株 2.活化菌株 (二活) February 1 1.操作超過濾 2 1.操作超過濾 2.減壓濃縮 3 1.減壓濃縮 4 1.膠體過濾層析 5 1.膠體過濾層析 2.測定膠體過濾 收集液之酵素 活性和蛋白量 8 1.蛋白質電泳 9 1.離子交換樹脂 (陰離子) 10 1.離子交換樹脂 (陰離子) 11 1.測定離子交換 樹脂收集液之 酵素活性和蛋 白量 工作內容 配固態培養基(MA)1L 配液態培養(MB)400ml 1.加水500ml 1.加水200ml 2.加入藥品 2.加入藥品 3.加水500ml 3.加水200ml 4.二沸 4.一沸 5.滅菌 5.滅菌 6.倒入器皿等凝固 6.完成 接種海洋菌 103、108 圖一、 接種至MA (三區分劃) 圖二、 接種至MB 圖三、 海洋菌於MA的生長狀況 保存菌株 1.製作凍管 將菌液0.7ml與甘油0.7ml混合均勻,放入-81?C的冷凍箱。 活化菌株 1.將凍管取出,放入碎冰中到形成液態。 2.利用接種環劃在MA上,放入培養箱。 配製基質 將配好的藥品(分為Agarose、藻渣)加熱均勻溶解後,使用分注器以每管900μl分裝於1*10cm螺旋試管內備用。 圖四、使用分注器 圖五、 配置好的基質 酵素活性測定法 1.先放100 ?C讓agarose溶解。 2.基質(900μl)agarose置於40 ?C水浴槽5min。 3.加入100μl的粗酵素液,於40 ?C 10min,使之反應。 p.s.:30 秒的間隔控制。 4.加入0.5ml的DNS,至100 ?C 5min,使酵素失活。 5.加入2ml二次水,冷卻至室溫,以546nm的波長下, 測OD值。 圖六、 酵素活性測定設備 操作超過濾 1.使用前用二次水洗3L。 2.使用後用二次水洗3L,再用0.1N NaOH洗3L。 3.壓力洗膜時40 psi。 4.跑樣品時20~50 psi之間。 5.20分鐘將管子換位置,避免管子軟掉使壓力下降。 圖七、 超過濾設備 減壓濃縮 1.將離心完的粗酵素液取出,經由超過濾將分子量小於100的酵素液分離,收集粗酵素液。 2.將100ml的粗酵素液減壓濃縮成10ml。 3.減壓濃縮時加熱溫度不可過高,因怕使酵素失活。 4.當突沸時,利用洩壓孔防止突沸。 圖八、 減
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