专题二微生物的培养无菌技术获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌.PPTVIP

专题二 微生物的培养 无菌技术 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开。 无菌技术 消毒与灭菌的区别？ 分类 定义 方法 灭菌法 杀灭一切微生物 物理法：热力、辐射、微波、等离子体 化学法：醛类、烷化剂 高效消毒法 杀灭一切致病微生物 紫外线、含氯剂、臭氧、复配剂等 中效消毒法 杀灭除芽孢外的致病微生物 超声波、碘类、醇类、酚类 低效消毒法 杀灭细菌繁殖体、亲脂病毒 单链季胺盐、双胍类、中草药、金属离子 消毒的方法： 1、100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 3、用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒 4、氯气消毒水源 5、紫外线消毒 …… 灭菌的方法： 1、灼烧灭菌 2、干热灭菌：160-170 ℃下加热1-2h。 3、高压蒸气灭菌：100kPa、121 ℃下维持15-30min. 基本操作程序 1、器具的灭菌 2、培养基的配制 3、培养基的灭菌 4、倒平板 5、微生物接种 6、恒温箱中培养 7、菌种的保存 1、培养基的配制 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 固体培养基 液体培养基 天然培养基 合成培养基 基础培养基 加富培养基 鉴别培养基 选择培养基 1、培养基的配制 牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌） 培养基的配制 牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌） 1．称量 2．溶化 3．调pH：　pH7．6　 4．过滤：这一步可以省去。 5．分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。 6．加塞 7．包扎 8．灭菌 9．倒平板 10．无菌检查：将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌是否彻底。 2、倒平板技术 2、倒平板技术 3、微生物的接种技术 微生物的接种技术 3、微生物的接种技术 4、微生物的恒温培养 4、微生物的恒温培养 5、菌种的保存 1、临时保藏：接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。 2、长期保存：甘油冷冻管藏法