蛋白组学方法介绍.pptxVIP

定量蛋白质组学张大伟天津工业生物技术研究所 zhang_dw@tib.cas.cn;蛋白样品制备 双向凝胶电泳 同位素标记技术（ICAT，iTRAQ，15N，SILAC） 无标记蛋白组学定量技术 定向蛋白质组学;蛋白质样品制备是蛋白质组研究的第一步，无论后续采用怎样的分离或鉴定手段，样品制备都是关键步骤。 ; 基本原则： （1）全息性（keep all of protein information），尽可能的制备所有蛋白； （2）样品制备的方法还必须与后续的分离或鉴定方法相匹配，如采用双向电泳，需要谨慎使用SDS抽提蛋白质；如果用液相色谱分离，不应该用太多的去污剂和两性电解质(considering following protocols/kits ) ； （3）由于样品来源千差万别，针对不同来源的样品（如细胞样品、动物组织样品、植物样品、体液等），需要采取不同的蛋白质抽提方法 (Different samples, different extraction) 。 ;1）温和裂解方法 (细胞,血细胞, 细菌) 渗透裂解（Osmotic lysis） 冻融裂解(Freeze-thaw or osmotic lysis) 去污剂裂解 (Detergent lysis, SDS) 酶裂解 (Enzymatic lysis，溶菌酶, 纤维素酶, 果胶酶, 溶细胞