蛋白质等电聚焦.pptVIP

等电聚焦简介 等电聚焦原理 等电聚焦技术 等电聚焦注意事项 等电聚焦的优缺点 固相pH梯度等电聚焦 等电聚焦技术的进展 蛋白质分子在偏离其等电点的pH条件下带有电荷，因此可以在电场中移动；当蛋白质迁移至其等电点位置时，其静电荷数为零，在电场中不再移动，就会产生聚焦现象，形成蛋白质区带，由此可将不同等电点的蛋白质分开。 二 等电聚焦技术 目前，用于蛋白质研究的等电聚焦有多种，根据IEF时所用的支持介质的种类不同，基本上可以分为两类：一类是在液体介质中的等电聚焦。另一类是在凝胶介质中的等电聚焦，即等电聚焦凝胶电泳。 以下我们将分别对这两类进行介绍。 2.1 液体介质 垂直柱状蔗糖密度梯度等电聚焦是原瑞典LKB公司早期用于制备和分析目的的等电聚焦方法。载体两性电解质在蔗糖密度梯度柱中形成pH梯度，样品根据他们的等电点进行分离，使用这种方法所需的时间较长。 有些也使用液体介质进行制备等电聚焦。但它是水平圆柱状方式，分成20个腔。腔间用单丝聚酯筛做成的膜隔开，据称使用这种方法所需的分离时间只要4小时左右，上样量可达4g。 4. 等电点必需有足够高电