LD四川调查报告试验室部分.docVIP

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LD四川调查报告试验室部分

四川省凉山州HIV分子流行病学调查结果 一、样本情况 于送检血浆样份,全部来自200年月日~月日间的HIV感染者,份样符合要求。 二、实验方法及结果 实验及分析方法 RNA提取及序列测定:使用Roche公司MagNA Pure LC system核酸自动提取仪提取本RNA。 PCR扩增:按照《全国HIV分子流行病学调查实验室操作手册》方案,通过逆转录/聚合酶链式反应扩增gag和env基因区部分片段,获得的片段测定序列,序列经清理以后进行进化分析。 HIV-1亚型确定:获得的gag和env基因区序列与HIV-1国际参考株比对后进行系统进化树分析,分别确定不同基因的亚型,对于发现的新重组模式的进行重组断点分析,结合2个片段的结果确定样本亚型。 实验结果 扩增情况 gag基因片段扩增阳性份,所占比例为%;env 基因片段扩增阳性份,所占比例为%。其中,测序后获得gag基因序列条,env基因序列条。 亚型结果 根据其env和gag基因片段,与HIV-1各个亚型国际参考株进行比对后构建系统进化树,结果见附图1和图2的亚型分析结果参见附表1。该省亚型种类参见附表2。在该省获得序列的份样本中,共存在种亚型传播的主要HIV流行毒株为CRF0_BC,流行毒株gag基因片段和env基因片段组内基因距离参见附表3。省获得序列的份样本参见附表参见附表 附图1:200年省HIV env基因系统进化树分析 附图2:200年省HIV gag基因系统进化树分析 附表1:200年省HIV分子流行病学调查亚型分析结果 附表2:200年省样本亚型分布情况 附表3:200年省主要流行毒株组内基因距离 附表2009年省附表2009年省 图12009年省HIV env基因系统进化树分析 2009年HIV gag基因系统进化树分析 表1 2009年四川省HIV分子流行病学调查亚型分析结果表2 200年省样本亚型分布情况 HIV亚型 病例数 比例(%) CRF07_BC 92.3 CRF08_BC 5 1.3 BC 1 0.3 待定 23 6.1 合计 100.0 表3 200年省主要流行毒株组内基因距离   gag_0_BC env _ C 序列数 124 基因距离 0.007±0.001 complete 0.038±0.003 pairwise 0.083±0.005 complete 0.143±0.007 pairwise 表 2009年省 CRF07_BC CRF08_BC BC 待定 总计 布拖县 183 1 1 17 202 甘洛县 41 1 0 1 43 金阳县 27 0 0 0 27 凉山州 1 0 0 1 2 美姑县 14 0 0 1 15 越西县 19 0 0 2 21 昭觉县 33 0 0 1 34 西昌市 32 3 0 0 35 合计 350 5 1 23 379 表 2009年省 CRF07_BC CRF08_BC BC 待定 总计 不详 46 2 1 4 53 母婴传播 5 1 0 0 6 其他(性传播) 1 0 0 0 1 性接触 + 注射毒品 23 0 0 3 26 异性传播 45 1 0 4 50 注射毒品 200 1 0 11 212 没有记录 30 0 0 1 31 合计 350 5 1 23 379

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