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双向操作手册
鸭肉—双向电泳
一 、溶液配制：
1 裂解液Ⅰ：（猪肉，外文MS 2005年） extraction buffer 20ml
7M urea 7×20×10-3×60.06 = 8.4084g
2M thiourea 2×20×10-3×76.12 = 3.0448g
1%（w/v）DTT 1%×20 = 0.2g
2%（w/v）CHAPS 2%×20 = 0.4g
40mM Tris 40×10-3×20×10-3×121.14= 0.0969g
5mM Pefabloc
1mM EDTA（EDTA-2Na） 1×10-3×20×10-3×372.24 = 0.00744g
0.8% carrier ampholytes 0.8%×20 ml= 0.16ml
裂解液Ⅱ：（大弹涂鱼肝脏组织，
中文生命科学仪器2009） extraction buffer 20ml
7M urea 7×20×10-3×60.06 = 8.4084g
2M thiourea 2×20×10-3×76.12 = 3.0448g
4%（w/v）CHAPS 4%×20 = 0.8g
40mM Tris 40×10-3×20×10-3×121.14= 0.0969g
用前每ml加
0.01gDTT 0.01g/ml
10μL TBP 10μL/ml
5μL两性电解质 5μL/ml
10μL PMSF 10μL/ml
2μL EDTA 2μL/ml
10μL亮肽素 10μL/ml
10μL抑肽素 10μL/ml
2 水化液Ⅰ：（猪肉，外文MS 2005年） 20ml
7M urea 7×20×10-3×60.06 = 8.4084g
2M thiourea 2×20×10-3×76.12 = 3.0448g
2%（w/v）CHAPS 2%×20 = 0.4g
5mM Pefabloc
0.2%（w/v）DTT 0.2%×20 = 0.04g
0.2% carrier ampholytes 0.2%×20 = 0.04ml
水化液Ⅱ：（大弹涂鱼肝脏组织，中文生命科学仪器2009） 20ml
7M urea 7×20×10-3×60.06 = 8.4084g
2M thiourea 2×20×10-3×76.12 = 3.0448g
4%（w/v）CHAPS 4%×20 = 0.8g
65mmol/ L DTT 65×10-3×20×10-3×154.25= 0.2005g
0.001% 溴酚蓝 0.001%×20 = 0.0002g
0.2% carrier ampholytes 0.2%×20 = 0.04ml
水化液Ⅲ：双向电泳实验指南 50ml
8M urea 8×50×10-3×60.06= 24g
4%CHAPS
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