LC和LC-MSD安全食品分析讲座（总体解决方案）.ppt

LC,LC/MSD安全食品分析 －总体解决方案 农药的分类 农药残留物的分析概述 农残分析的三个过程 定性 定量 确认 常用农残分析方法 气相色谱法 - FID, ECD, FPD and NPD 薄层层析法 液相色谱法 - UV and FLD 红外光谱法 气质联用技术? 是目前最有效的方法, 而且灵敏度很高。色质联用是最有效的农残确认方法 液质联用技术 农残分析流程 样品/分析的类型 样品的制备方法 样品的净化和浓缩 分析仪器的选型 数据分析 质量控制(quality control) 结果报告 样品和农残的类型 样品的类型 高含水量的样品 低含水量的样品 含糖量高的样品 含脂肪高的样品 环境样品 特殊样品 分析农残物的类型 含卤素的样品 有机磷化合物 氨基甲酸盐类 有机氮化合物 有机硫化合物 除虫菊酯及拟除虫菊酯 样品的制备方法 样品的粉碎及均质 溶剂萃取 样品量: 10g, 20g, 50g, or 100g 混合及Omni-mixer 溶剂 丙酮 -US FAD Acetonitrile - CDFA Ethyl acetate - Sweden 提取方法 可根据待测农药的性质，样本种类和实验室条件选择适当的提取方法。常用方法有以下几种： 浸渍，漂洗法：对附着在样本表面的农药有很好的提取效果。 振荡法：样本+提取剂，振荡数小时，普遍采用。 匀浆，捣碎法：样本放在匀浆杯（捣碎杯）中，加提取剂，快速匀浆几分钟。简便，快速，效果好，普遍采用。 索氏提取法：经典提取法，也叫完全提取法，效果好，但时间过长，干扰物质较多。 消化法：样本先消化，再用提取液提取，用于不易匀浆，不易捣碎的动物组织样本。 其他方法：超声波提取法，吹扫蒸馏法，SFE等。 为提取充分，往往要经三次或多次提取。提取含水量高的样本中时,有时需加无水硫酸钠；提取含糖量高的样本中农药时，或干燥土壤中农药时，需加适量水，能提高提取效果。 样本的净化 将样本中待测农药与干扰杂质分离的处理步骤 液-液分配法：通常采用极性溶剂与非极性溶剂配成溶剂对进行多次分配，使干扰杂质和待测农药分离，达到净化目的。常用的溶剂对有：乙晴-正己烷（石油醚），二甲基甲酰胺（DMF）-正己烷（石油醚），二甲基亚砜（DMSO）-正己烷（石油醚），丙酮-正己烷，丙酮-二氯甲烷（石油醚），丙酮层需加10倍的2%或4%硫酸钠或氯化钠水溶液。 吸附柱层析法：常用的吸附剂有：弗罗里硅土，三氧化二铝（酸性，中性，碱性），硅胶，活性碳，硅燥土。 通常吸附剂在用前需经高温烘烤3小时以上活化。 70年代后期，微型柱被应用于农药残留检测工作，提高了净化效果。 样本的净化（续） 凝结沉淀法： 待净化溶液中加入一定的凝结剂（如氯化铵+磷酸），能使溶液中的蛋白质，脂肪，腊质等干扰物沉淀析出，再经离心，可达到净化目的。 冷冻法： 低温处理样本提取液，使溶液中的蛋白质，脂肪，腊质等干扰物沉淀析出，过滤除掉杂质。 其它方法： 吹扫蒸馏法，薄层层析法，磺化法，凝胶渗透层析法，离子交换层析法，高压液谱柱净化法。 样品的制备方法(续) 样品净化 水相分离 加NaCl 加无水硫酸钠 冷冻或吸附 溶剂分配 所有以上的组合 净化 - 前或后 - 水相分离 反相SPE - C18 或活性炭 样品的制备方法(续) 样品净化 凝胶过滤色谱(gel permeation Chromatography) SPE pH adjustment of solvent extracts Phosphate Buffer (2M, limit volume added) 样品的制备方法(续) 样品的浓缩 K-D样品浓缩器 氮气蒸发器 开口烧杯(水浴) 真空旋转蒸发仪 分析仪器的选择 GC/FPD(6890 GC) - 适合有机磷和有机硫农残化合物 GC/ECD (6890 GC) - 适合有机氯农残化合物 GC/NPD (6890 GC) - 适合有机氮和有机磷化合物 GC/MSD (5973N GC/MSD) 通用的分析方法 结合NIST98 标准谱库和农药谱库可以进行农残化合物的鉴定 高灵敏度, 高选择性 HPLC - 柱后衍生用荧光检测 (1100 HPLC Series) 适合氨基甲酸盐类化合物的分析 LC/MS - 高灵敏度, 高选择性的检测方法 min 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 340 360 380 400 420 440 抗生素药物(Ⅰ)(1ppb)选择离子流图 m/z=335 Penicillin G Created by Takino and edited by Li