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- 2018-05-03 发布于四川
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有效利用木糖产琥珀酸大肠杆菌菌株的构建;主要内容;选题依据及研究意义;;E.coli本身可以利用木糖生产琥珀酸,但是产生的琥珀酸产率并不理想。
AFP111(ΔptsG,ΔpflB,ΔldhA)[1]
因此,本课题的研究目的在于提高琥珀酸的产率。;技术路线;1. 利用基元模式分析(EMA)进行敲除路线的模拟分析;EMA原理:MPA;所有途径;选择模拟敲除的三个标准;Example[3];;戊糖的利用;己糖的利用;戊糖和己糖共利用;;敲除7个反应后的每个Ems的分析;Ingram课题组利用代谢进化和代谢工程相结合构建了厌氧条件下,以葡萄糖为底物生产琥珀酸的菌株,其中KJ060 (ΔldhA, ΔpflB, ΔadhE, Δack, ΔmgsA )菌株可以达到1.61molSuc/molGlu。[2]
;PEP?SUC
;ptsG的敲除
①在Glu运输过程中,如通过ptsG会消耗1个PEP
②敲除ptsG会减少葡萄糖效应
;ΔpflB的影响?
①pflB催化生成acetyl-CoA,这一反应是合成acetyl-CoA的主要反应,而acetyl-CoA是生物合成的必须??谢物。
②在敲除了acetyl-CoA后,可以过表达丙酮酸脱氢酶复合体(aceEF, lpd),从而达到产生acetyl-CoA的目的。
;;减少乙酸生成量
①tdcD编码的酶有丙酸裂解酶,乙酸裂解酶活性;
②tdcE能
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