第十二章_核磁共振技术.pptVIP

* * * * * * * * * * * * 化学位移产生的原因是分子中运动的电子在外磁场下对核产生的磁屏蔽。屏蔽作用的大小可用屏蔽因子σ来表示。一般来说屏蔽因子σ 是一个二阶张量，只有在液体中由于分子的快速翻滚，化学位移的各向异性被平均，屏蔽因子才表现为一常量。 　　实际测定中化学位移是以某一参考物的谱线为标准，其他谱线都与它比较，即以一无因次的量δ表示化学位移的大小。常用参考物是四甲基硅(TMS)。 * * * * * * 为图加入解释： * * * 傅立叶变化是通过计算机进行的，单次脉冲方式与连续波方式的信号强度和信噪比近似相同，但速度较快。脉冲核磁共振谱可以通过施加一系列的脉冲，累加多次重复FID信号，再进行傅立叶变换，以提高信噪比。由于脉冲法的特点，它可以检测瞬时或长寿命的核，可以有选择性地增强灵敏度。 * * 目前使用的核磁共振仪有连续波（CN）及脉冲傅里叶（PFT）变换两种形式 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * NMR在生命科学中的应用 NMR与天然产物化学结构鉴定研究 目前NMR技术已经广泛应用于天然产物有效成分的结构鉴定上,如生物碱类的钩吻生物碱、单猪屎豆碱、千层塔生物碱甙类的刺五加种子的三萜皂甙、小叶丁香橄榄苦甙、卷丹皂苷、三七皂甙、北沙参橙皮素A萜类的山茱萸环烯醚萜、扁枝藓锯齿石松烷型三萜;芳香族化合物的绵马贯众素、北五味子木脂素、葛根葛根素、吴茱萸内酯、银杏苦内酯和白果内酯；肽类的二蕊荷莲豆环肽、虎纹捕鸟蛛毒素、海南捕鸟蛛毒素、马氏钳蝎短链神经毒素。 NMR在生命科学中的应用 NMR与蛋白质三维结构或构象的测定 截止到2005年11月29日在PDB()数据库中总共30995个蛋白质(包括肽和病毒)中有4332个是由NMR获得的,约占14%。目前,蛋白质三维结构的研究是国际上的热点。 1985年Wüthrich通过他提出的“利用核磁共振技术测定溶液中生物大分子三维结构法” 测定了蛋白酶抑制剂IIA (proteinase inhibitor IIA, PDB ID: 1BUS, 2BUS) 的结构。 /pdb/explore.do?structureId=1BUS NMR在生命科学中的应用 蛋白质与配体相互作用的NMR研究 由于结合态与游离态的配体分子中原子核自旋的核磁共振参数(化学位移、弛豫时间和扩散系数等)存在有较大差异,因此可通过NMR得到蛋白质结构变化的动力学信息,这对于药物的设计和筛选优化是非常有用的。而且NMR所研究的是在接近生理环境下的液态蛋白质的动力学性质,所得到的结果更具有说服力。 NMR在生命科学中的应用 核酸结构测定 5SE RNA谱及结构 [Fürtig B, Richter C, W?hnert J, and Schwalbe H. ChemBioChem 4: 936 – 62, 2003 NMR在生命科学中的应用 蛋白质-核酸复合物 Cerdan R, Payet D, Yang JC, et al. HMG-D complexed to a bulge DNA: An NMR model. Protein Sci. 10: 504-18, 2001. NMR在生命科学中的应用 NMR与生物分子的定量分析 用NMR技术进行定量分析的最大优点是:不需引进任何校正因子或绘制工作曲线,即可直接根据各共振峰的积分高度的比值求算该自旋核的数目。 NMR在生命科学中的应用 NMR与代谢物的动态变化 利用NMR可以在不做任何物理分离(无损伤性,不破坏样品的结构和性质)和化合物定性分析的条件下,可在一定的温度和缓冲范围内进行生理条件或接近生理条件的实验,表征和研究海量的代谢信息及其变化规律(代谢组学),从而得到丰富的生理、病理、药理和毒理等生物学信息。 NMR在生命科学中的应用 NMR指纹图谱技术与中药的鉴定、分类 对NMR特征指纹图谱的解析可以进行中药的鉴定和分类,从而控制中药的质量,实现中药的现代化。 NMR在生命科学中的应用 NMR成象技术与临床检测 NMR成像技术以其无辐射损伤、无破坏性、无试剂侵入、能获得全立体图像等突出优点很快就受到科学界的重视,技术发展非常迅速。其几乎集各种医学成像的优势于一身,很快就在临床定位、诊断和治疗监视中发挥了重要作用。 NMR在生命科学中的应用 生物膜研究 3个生物膜蛋白质 (a) OmpX; (b) OmpA; (c) PagP [Fernández C, Wüthrich K. NMR Solution Structure D