人教版选修3专题二第二节 动物细胞工程（共23张PPT）.ppt

动物细胞工程常用的技术手段： 动物细胞与组织培养、 动物细胞核移植、 动物细胞融合、 单克隆抗体 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 三、动物细胞培养的过程： 动物细胞生长特性： 细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 细胞贴壁过程 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代培养。 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。 动物细胞培养条件： 1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、动物血清等。） 3、温度和PH 36.5+（-）0.5度, PH为7.2-7.4 4、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 目前还不能用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体，用动物体细胞克隆的动物，实际是通过核移植来实现的。 核移植概念: 　　将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新胚胎最终发育成动物个体。 　　用核移植的方法得到的动物称为克隆动物 思考题 思考题 * 提问： 植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 植物组织培养, 植物体细胞杂交 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 剪碎组织 分散成单个细胞 细胞悬液 10代细胞 50代细胞 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 发生癌变 无限传代 培 养 液 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 正常细胞 分化程度低，分裂旺盛,容易培养。 动物组织细胞之间有一定量的弹性纤维和胶原纤维等蛋白质，使细胞紧密地结合在一起。 用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 胰蛋白酶 概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖 原理：细胞增殖 保证细胞顺利的生长增殖 动物细胞培养液的主要成分： 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。 与植物培养基相比其特点是： （1）液体培养基 （2）含有动物血清 动物体细胞大都生活在液体的环境 动物细胞培养技术的应用 （1）生产蛋白质生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。 （2）基因工程也离不开动物细胞的培养 （3）用于检测有毒物质 （4）用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据 （5）获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮。 海拉(hela)细胞系 原代培养表皮细胞和真皮细胞用于皮肤移植 表皮细胞 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体 培养结果 大量获得细胞或细胞产物 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物组织培养和动物细胞培养的比较 蔗糖、植物激素 葡萄糖、动物血清 动物细胞核移植 核移植 胚胎细胞核移植 体细胞核移植（难度高） 原理： 动物体细胞核的全能性 受体细胞：MⅡ期的卵母细胞 电激处理使供体核进入受体卵母细胞构建重组胚胎 卵母细胞采集、培养 MⅡ期卵母细胞 供体牛 供体细胞注入去核卵母细胞 代孕母牛 克隆牛 体细胞培养 去核卵母细胞 去核 胚胎 移植 克隆羊“多利”的产生过程: 多莉羊的培育过程 融合后的卵细胞 细胞核移植 卵细胞 母羊C子宫 母羊B 母羊A 乳腺细胞 细胞质 细胞核 胚胎移植 早期胚胎 多莉羊 分娩 卵裂 妊娠 多莉羊诞生的意义： 这说明已经分化的动物体细胞核，仍然具有全能性，在合适的条件下，就可以发育成新的个体。 减数第二次分裂中期（MⅡ期卵母细胞） 去核的卵母细胞 供体细胞注入去核卵母细胞 受体细胞激活，完成减数分裂、发育 胚胎移植 1、对比多莉羊和高产奶牛的克隆过程，找出操作过程的不同点？ 多莉克隆过程的受体细胞是去核卵细胞，而高产奶牛的克隆过程的受体细胞是去核卵母细胞；多莉克隆过程是将供体细胞核注入受体细胞，而高产奶牛的克隆过程是将供体细胞注入受体细胞。 2、讨论分析上述哪一种措施更科学？并说明理由？ 卵母细胞当中的细胞周期蛋白含量、活性比卵细胞高，用它作受体更容易成功 将供体细胞注入受体细胞，使克隆