食用菌污染原因分析7.docVIP

菌种生产杂菌污染的原因分析 1．灭菌不彻底 这一原因特点是导致的污染率高、发生早，出现污染的部位不规则——培养基上中下均可出现杂菌菌落。这类污染常在接种培养3～5天后发生。一般杂菌的菌丝体与孢子经过高压121～1270C保持1．5～2．5h均能杀死。消毒不彻底引起的污染往往是由于没达到规定的温度与时间，或者是高压灭菌时冷空气没放尽所致。另外，装锅时摆放太紧密，通气性不好，灭菌锅发生漏气，温度、压力达不到所需数值也可导致杂菌产生。 2．培养料问题 拌料时主料与辅料未充分拌匀；水分含量不足或培养料成团未散开，吃水不透造成灭菌死角；或者培养料不新鲜，本身带杂。 3．母种带杂 菌种本身不纯。无论是母种、原种还是栽培种，都要使用纯种接种培养。如果用于繁殖扩大的菌种本身不纯，那么制备的新菌种也必然受到污染。污染常常表现在接种菌块之中或周围，呈小批量的规模，如果此时不能及时发现，危害将进一步加大。有时生产的一批菌种中。集中在一起的菌种都出现污染，且都发生在接种块周围则说明菌种带杂。因此，在生产母种时，要经常检查，对污染物及时清理，防止扩大时进一步污染。 4．接种污染 这类污染的特点是杂菌菌落先从菌种块上长出．杂茵的种类一致，通常成批量发生，且出现早，接种3-5天内就可肉眼鉴别。接种室或操作台消毒不彻底．接种时操作不严格，将杂菌孢子带入瓶中，这种污染常分散出现于菌种表面。如一支被污染的母种会造成扩接后的4—6瓶原种全部污染：一瓶被污染的原种(有时肉眼难以发现)造成扩大后的30～50瓶栽培种的污染。这类污染要靠严格检查菌种质量来克服，不但使用前要认真检查．而且在培养全过程中要连续检查和观察．确保菌种纯度。 5．接种操作污染 这类污染一般发生在接种口处．较接种物带菌和灭菌不彻底造成的污染发生晚．一般接种后7d左右出现。其污染源主要是：接种室(箱)空气消毒不彻底；菌种瓶(袋)冷却时附在表面的杂菌；接种人员自身洁净度不良：违反接种操作规程等。操作不规范造成的菌种污染，杂菌不仅在接种块周围，还常出现在其他料面的表面，呈花花点点状，不一定集中一处，且无规律。这些操作技术包括灭菌操作、灭菌后无菌处理、接种过程无菌操作、接种后的培养条件控制等。需注意以下技术环节： 5．1不使棉塞打湿灭菌码放时．棉塞切勿贴触锅壁；灭菌结束后要自然冷却，不可强制冷却；当冷却至一定程度后微开锅门．让锅内的余热把棉塞上的水气蒸发；灭菌时，可同时灭菌一些棉塞，留接种时换下打湿的棉塞。 5．2洁净冷却灭菌后的菌种瓶(袋)不能直接放在有尘土的地面上冷却：冷却窒使用前可用紫外线灯和喷雾相结合进行空气消毒。 5．3严格消毒接种室(箱)使用前须严格消毒；接种操作人员须在缓冲间穿戴专用衣帽(定期洗涤)； 接种前要消毒双手。 5．4科学操作接种前做好一切准备工作。一次接种不间断。一气呵成：接种过程要少搬动、少说话、小动作，以减少空气震动和流动；接菌室(箱)内绝对无菌的只有酒精灯火焰周围很小的范围．接种操作应尽量在这个小区内完成；拔棉塞时，不可用力直线上拔．而应旋转式缓劲拔出，避免外界空气突然进入而带入杂菌；接种室(箱)每次的接种量不宜过大；接种时．接种工具一旦触碰了非无菌物品，如种瓶外壁、操作台面等．不要再用来取种．须重新火焰灼烧灭菌。 6．设备设施简陋引起灭茵后无菌状态的改变 本来灭菌后的菌种瓶(袋)已达无菌状态．但灭菌后的冷却和接种环境达不到洁净无菌．生产设备和生产环节分散．又往往忽略场地的大环境卫生，导致了污染。冷却过程中．随着料温的降低，瓶(袋)内气压降低．杂菌孢子随其内外气压的动态平衡向瓶(袋)内移动、定植。瓶袋外附有较多的灰尘(附着杂菌孢子)。成为接种操作污染的污染源。这种类型接种后污染率较低．随着培养时间的延长．污染率逐渐增高。通常大量发生在接种10d以后．甚至培养基表面已长满菌丝后，才陆续出现污染。 7．培养室及周围环境差 培养室温度太高，培养室相对湿度太大，超过70％以上利于杂菌滋生；培养室通气不良，有利于某些厌氧菌发生；培养室本身不干净，消毒不严，空气中本身带杂。接种后污染率低，随着时间推移污染率逐渐增高，这就是由培养环境造成的污染。如培养环境过于潮湿、污染源严重污染培养室、菌瓶棉塞潮湿、苗袋破裂、虫鼠危害等。 综合控制措施 1．灭菌要彻底 高压灭菌上压前放尽冷空气，上压后保持规定的压力与时间，高压灭菌应在锅内温度上升到121℃后再保持1．5～2．5h。高压灭菌，锅内瓶放置时应留一定的空隙，利于空气流动。灭菌彻底高压灭菌以147．1千帕，保持2小时，常压灭菌要求4小时内温度达到100℃后，持续不低于16～18小时的灭菌时间，中间不降温。 2．灭菌容量和堆放方式 用蒸汽锅炉送入蒸汽的高压灭菌锅．要做到锅炉汽化量与锅体容积相匹配，自带蒸汽发生器的燃煤、燃油或电热的高压灭菌锅．以每