高一实验二还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定5.docVIP

高一生物 实验二 生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 实验点拨 1、生物学化学中物质的鉴定,其原理是被鉴定的物质与所用的化学试剂要么发生颜色反应,要么产生沉淀, 在生物学中物质鉴定的理念是:某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应.可溶性还原糖+ 斐林试剂→砖红色沉淀.(水浴加热)脂肪小颗粒 + 苏丹染液→橘黄色小颗粒.(要显微镜观察)蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色反应.(要先加A液NaOH 溶液再加B液CuSO4 溶液)还原糖的鉴定实验选择含糖量较高,颜色为白色或近白色的植物组织以苹果,梨为最好加石英砂水研磨斐林试剂要两液混合均匀且现配现用斐林试剂的配制过程示意:斐林试剂甲液( 0.1 g/ml的 NaOH 溶液)斐林试剂乙液( 0.05 g/ml的 CuSO4 溶液)脂肪的鉴定实验选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好实验前浸泡3h～4h蛋白质的鉴定实验可用浸泡1d～2d的黄豆种子(或用豆浆,或用鸡蛋蛋白稀释液).双缩脲试剂的使用,一定要先加入A液(即0.1 g/ml的 NaOH 溶液),再加入双缩脲试剂B液(即0.01 g/ml的 CuSO4 溶液).还可设计一只加底物的试管,不加双缩脲试剂,进行空白对照,说明颜色反应的引起是蛋白质的存在与双缩脲试剂发生反应,而不是空气的氧化引起.斐林试剂配制选材制备组织样液组织样液加斐林试剂 (由斐林试剂甲液和乙液充分混合而成,不能分别加入)水浴加热观察溶液颜色变化浅蓝色→棕色→砖红色.结论:还原糖与斐林试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀脂肪的鉴定取材片滴苏丹染液去浮色制成临时装片观察先在低倍镜下,找到材料的脂肪滴,然后,转为高倍镜观察.结论细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色.蛋白质的鉴定斐林试剂双缩脲试剂斐林试剂和双缩脲试剂的比较相同点:都由NaOH溶液和CuSO4溶液构成;斐林试剂甲液和双缩脲试剂A都为0.1g/mL NaOH溶液.不同点:CuSO4溶液浓度不一样:斐林试剂乙液为 0.05 g/mLCuSO4溶液,双缩脲试剂 B为 0.01g/mLCuSO4溶液.配制比例不一样.使用方法不一样:斐林试剂是甲,乙液一起混合后再使用,双缩脲试剂则是先向待鉴定材料加入A试剂摇匀后,再加入试剂B.鉴定的对象不一样:斐林试剂鉴定的是还原糖,双缩脲试剂鉴定的是蛋白质.反应本质及颜色反应不一样.1.可溶性还原糖的鉴定实验:选择含糖量较高,颜色为白色或近白色的植物组织,以苹果,梨为最好.2.脂肪的鉴定实验:选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好(实验前浸泡3h～4h).3.蛋白质的鉴定实验:可用浸泡1d～2d的黄豆种子(或用豆浆,或用鸡蛋蛋白)..仪器:剪刀,解剖刀,双面刀片,试管,试管架,试管夹,大小烧杯,小量筒,滴管,玻璃漏斗,酒精灯,三脚架,石棉网,火柴,研钵,石英砂,纱布,载玻片,盖玻片,毛笔,吸水纸,显微镜.试剂斐林试剂(0.1g/L的NaOH溶液+ 0.05g/mL的CuSO4溶液);苏丹染液;双缩脲试剂; 体积分数为50%的酒精溶液;蒸馏水. 可溶性还原糖 脂肪 蛋白质 原 理 与斐林试剂反应生成砖红的沉淀 被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色） 与双缩脲试剂反应产生紫色物质 探究 步骤 样液 制备 选材 含糖较高、颜色白色或近于白色的植物组织，苹果、梨最好 富含脂肪的种子，以花生最好 浸泡1-2d的黄豆种子（或用豆浆）或用鸡蛋蛋白 方法 苹果切块→研磨→过滤→滤液 制作花生种子的切片 黄豆浸泡切片→研磨→过滤→滤液 鉴定 步骤 样液→加斐林试剂→振荡→水浴加热煮沸 切片→染色→漂洗→镜检 组织样液→加双缩脲试剂A→再加双缩脲试剂B→观察颜色变化 探究记录 1、蓝色→＿＿＿→＿＿＿＿＿＿ 2、脂肪被＿＿＿染液染成＿＿＿（或被苏丹Ⅳ染成红色） 3、加＿＿＿＿＿＿＿无明显变化，加＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿后溶液变成＿＿＿＿ 探究思考 4、选材要用含＿＿较高、颜色＿＿色或近于＿＿色的植物组织。斐林试剂不稳定，一般配成A液（＿＿＿＿＿＿＿＿）和B液（＿＿＿＿＿＿＿）来保存，用时必须将A、B两液＿＿＿＿＿＿后使用，切勿＿＿＿加入组织样液中进行检测 5、? 切片要尽可能的＿ ?? 染色后一定要用＿＿＿＿＿＿＿溶液洗去浮色 为什么观察处最好只有1---2层细胞？ 6、用鸡蛋蛋白时，为什么一定要加以稀释？ 使用时双缩脲试剂时，为什么应先加A液再加B液？ ［讨论与交流］ 1、鉴定实验设计的理念具体原理在鉴定尿液中是否含有葡萄糖时还能用其他那些鉴定方法 ①实验目的：鉴定一种茅草的根是否含有还原性糖和淀粉。 ②实验原理：还原性糖可用???????? 试剂鉴定，淀粉可用?????????? 试剂来鉴定。 ③实验器材：