山东省邹城市第一中学2017学年动物细胞融合和单克隆抗体的制备.ppt

一.动物细胞融合 活动1：设计方案 如何大量获得化学性质单一、特异性强的抗体？（同桌讨论） 3、单克隆抗体的应用 * * 2002年12月30日， 两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，植物细胞“新人”—黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体，动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，两批新人同时在电融合仪内孕育新生命。 “太空婚礼” 这两场“太空婚礼”实质是哪两项细胞工程技术 植物体细胞杂交技术 动物细胞融合技术 2.2 动物细胞工程 2.2.2 动物细胞融合和单克隆抗体 杂种细胞 愈伤组织 杂种植株 植物细胞A 植物细胞B 原生质体A 原生质体B 去壁 原生质体融合 植物组织培养 植物体细胞杂交 你认为通过动物细胞融合可以获得杂种动物吗？ 1、如果让动物细胞进行融合，应注意动、植物之间的哪些区别？ 无细胞壁 全能性受限制，不能发育成杂种动物 动物细胞融合与植物细胞杂交的不同： 无需去除细胞壁 不能培养成新的动物个体 2、请同学们根据植物体细胞杂交技术，设计动物细胞融合的流程。 杂种细胞 愈伤组织 杂种植株 植物细胞A 植物细胞B 原生质体A 原生质体B 去壁 原生质体融合 植物组织培养 植物体细胞杂交 动物细胞融合过程 不同DNA的两个细胞 灭活的病毒 有丝分裂 两个完整的杂交细胞 1、为什么可以用灭活的病毒？ 2、病毒不灭活可以吗？ 不灭活的病毒会感染细胞，而不能诱导细胞融合。 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 1.概念： 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 4.结果： 形成含有2或多个细胞遗传物质的单核杂交细胞 2.融合原理： 细胞膜的流动性 3.诱导方式 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活的病毒(特有) 5.意义： 突破有性杂交局限，使远缘杂交成为可能 广泛应用多个领域 为制造单克隆抗体开辟了新途径 6、植物体细胞杂交和动物细胞融合的区别 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞融合原理 是否需去壁 诱导方法 用途 获得杂种植株 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 植物细胞的全能性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 诱导细胞融合 物理（离心、振荡、电激） 化学（聚乙二醇） 物理、化学方法（同左） 灭活的病毒 主要用于制备单克隆抗体 二.单克隆抗体 1、抗体是由何种细胞产生的？ 2、一个浆细胞能产生几种抗体？ 浆细胞（效应B细胞） 动物在免疫反应的过程中，体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上，但是，每一个浆细胞只能分泌一种特异性抗体 抗原 动物体内 刺激 浆细胞 抗体 抗原不纯 抗体不纯 筛选单一B细胞 不能无限增殖产生大量抗体 缺陷：产量低、纯度低、特异性差。 3、传统抗体制备方法及缺陷 二.单克隆抗体 提示： 2.什么样的细胞可以无限增值？ 二.单克隆抗体 1.什么样的细胞可以产生抗体？ 3.什么方法可以使一个细胞表现两种细胞的特征？ 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能够无限增殖 杂种细胞 二、单克隆抗体 1. 设计方案： （一）单克隆抗体的制备 2、单克隆抗体 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 特点：特异性强，灵敏度高，可大量制备 二、单克隆抗体 （一）单克隆抗体的制备 活动2： 请同学们观看视频，完成单克隆抗体制备过程的图解，思考讨论解决以下问题。（8分钟） 1.要给小鼠做什么处理？为什么？ 2.融合后有几种细胞？有几种杂交细胞？ 3.制备过程中两次筛选的目的分别是什么？ 4.如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？ 产生所需抗体的 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 产生其他抗体的 B淋巴细胞 除了动物细胞融合的方法制备单克隆抗体，你还有别的方法吗？请与同桌讨论，拿出新的方案。 ？ （1）作为诊断试剂——最广泛应用 准确、高效、简易、快速 （如同位素标记单克隆抗体，可诊断肿瘤、心血管畸形等） * *