现代生物科技专题《基因工程》 课件 1.ppt

⒈概念：一般指利用分子生物学的手段 ，在体外操纵、改造、重建细胞的基因组，从而使生物体的遗传性状发生定向变异，获得人们所需的性状。 ⒉特点：基因工程能够打破种属的界限，在基因水平上改变生物遗传性，并通过工程化手段为人类提供有用的产品及服务。 第一步：获取目的基因： 基因的直接分离或人工合成。即获取含有所需要的完整的遗传信息的DNA片段。 转黄瓜抗青枯病基因的甜椒 转鱼抗寒基因的番茄 3、基因工程与环境保护 ⑴　环境监测：　　基因工程做成的DNA探针能够十分灵敏地检测环境中的病毒、细菌等污染。 1t水中只有10个病毒也能被DNA探针检测出来 * * 田家炳中学 基因工程 1.什么叫基因？ 思考讨论 3.遗传信息是如何表达的？ 2.基因、DNA、染色体 之间是怎样的关系？ 基因的结构 原核细胞的基因结构 真核细胞的基因结构 非编码区 非编码区 编码区 与RNA聚合酶结合位点 原核细胞基因结构示意图： 不能转录为信使RNA 不能转录为信使RNA 能转录为信使RNA ， 非编码区 编码区 非编码区 与RNA聚合酶结合位点 外显子 内含子 真核细胞基因结构示意图： 非编码区 非编码区 编码区 真核细胞基因结构示意图： 原核细胞基因结构示意图： 能够转录为相应的信使RNA，进而指导蛋白质的合成，也就是说能够编码蛋白质 不能转录为信使RNA，不能编码蛋白质 非编码区： 编码区 外显子: 能够编码蛋白质的序列叫做外显子 内含子: 不能够编码蛋白质的序列叫做内含子，内含子能转录为信使RNA 真核细胞与原核细胞的基因结构区别: 连续编码区、非连续编码区 ㈠　基因操作的工具 1.基因的剪刀──限制性内切酶（限制酶） 　　一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将DNA 分子切断。目前已发现的限制酶有200多种。 重播 　　DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏性末端”。被同一种限制切断的几个DNA具有相同的黏性末端，能够通过互补进行配对。 ２、基因的针线──DNA连接酶 　　连接酶的作用是：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。 重播 3、基因的运输工具——运载体 　　运载体必须同时满足三个要求：①能与目的基因结合；②能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达；③比较容易得到。 ①鸟枪法 ②分子杂交法 ③逆转录法 ④人工合成法 目的基因获取方法 基因工程基本步骤 　用限制酶切断成许多片段 　　将供体生物的DNA用限制酶切割为许多片段，再用运载体将这些片段都运载到受体生物的不同细胞中去。只要有一个细胞获得了需要的目的基因并得以表达，基因工程就算成功了。该法最大的缺点是带有很大的盲目性，工作量大，成功率低。且不能将真核生物的基因转移到原核生物中去。 ⑴直接分离基因——鸟枪法 ⑵人工合成基因法 DNA合成仪 　　②直接合成法：根据蛋白质的氨基酸顺序推算出信使RNA核苷酸顺序，再据此推算出基因DNA的脱氧核苷酸顺序。用游离脱氧核苷酸直接合成相应的基因。 　 ①逆转录法：以信使RNA为模板，在逆转录酶的作用下将脱氧核苷酸合成合成DNA(基因)。 1能在宿主细胞内复制并稳定的保存 2具有多个限制酶切点， 3具有某些标记基因 1、运载体的选择 第二步：目的基因与运载体结合 2、目的基因与运载体结合 　　用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口，将目的基因插入切口处，让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后，在连拉酶的作用下连接形成重组DNA分子。 第三步目的基因的导入和表达 通过运载体把目的基因带入某生物体内，并使目的基因在受体细胞内能准确地转录和翻译。 导入 扩增 为使重组的DNA分子更容易进入受体细胞，通常要用CaCl2对受体细菌进行处理，使受体细菌具有更大的通透性。 第四步目的基因的检测和表达 　　大量的受体细胞接受不多的目的基因。处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少，必须将它从中检测出来。 将每个受体细胞单独培养形成菌落，检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落，保留有表达产物的进一步培养、研究。 无表达产物 无表达产物 有表达产物 无表达产物 　　 １、基因工程与医药卫生 我国生产的部分基因工程疫苗和药物 ⑴ 基因工程药品的生产 　　许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限，其价格往往十分昂贵。 　　微生物生长迅速，容易控制，适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内，让它们产生相应的药物，不但能解决产量问题，还能大大降低生产成本。 １、基因工程与医药卫生 我国生产的部分基因工程疫苗和药物 ⑴ 基因工程药品的生产 　　许多药品的生产是从生物组