纯化大肠杆菌.ppt

* 巩固练习 1、培养基、培养皿、接种环、实验者的双手、空气所采用的灭菌、消毒方法依次是( ) ①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线灭菌 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法 A．⑤③②①④ B．①②③④⑤ C．⑥②③④① D．③④②①⑥ 2、获得纯净培养物的关键是 ( ) Ａ．将用于微生物培养的器皿、接种用具、培养基等进行灭菌 Ｂ．接种纯种细菌 Ｃ．适宜环境条件下培养 Ｄ．防止外来杂菌的入侵 巩固练习 0.1万单位 青霉素 0.5 g MgSO4·7H2O 1 000 ml H2O 15 g 琼脂 30 g (CH2O) 1 g K2HPO4 0.01 g FeSO4 3 g NaNO3 含量 成分 含量 成分 3、下表所示为某微生物培养基的配方，请回答： （1）物理性质，该培养基属于________培养基。依用 途划分，则属于________培养基。 ⑵根据培养基原料，所培养微生物的同化作用的类型 是?___________。（异养型/自养型） 固体 选择 异养型 纯化大肠杆菌 1、本实验所用的培养基是牛肉膏蛋白胨固体培养基 2、本实验可分成配制培养基和纯化大肠杆菌两个阶段。 （一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1.计算： 根据配方比例，计算配制100mL培养基的用量 2.称量： 3.溶化： 将各成分加水溶解并定容至100mL。 4.灭菌： 培养基、培养皿 5.倒平板： 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方 H2O 定容至1000ml NaCl 5g 蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 琼脂20.0g 思考3：在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中，动作要迅速，原因是什么？ （一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 防止牛肉膏吸收空气中的水分 思考4：溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么？ 防止琼脂糊底而导致烧杯破裂 5.倒平板 待培养基冷却至50℃左右时在酒精灯火焰附近操作 ① ② ③ ④ ①在火焰旁右手拿 _______，左手 _______. 锥形瓶 拔出棉塞 5.倒平板 待培养基冷却至50℃左右时在酒精灯火焰附近操作 ① ② ③ ④ ②锥形瓶的瓶口 ________________。 迅速通过火焰 5.倒平板 待培养基冷却至50℃左右时在酒精灯火焰附近操作 ① ② ③ ④ ③左手将培养皿 ______________,右手 ___________________, 立刻盖上皿盖。 打开一条缝隙 将培养基倒入培养皿 5.倒平板 待培养基冷却至50℃左右时在酒精灯火焰附近操作 ① ② ③ ④ ④待平板冷却凝固后，将平板 ________________。 倒过来放置 5.倒平板 思考5：锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？ 消灭瓶口杂菌，防止杂菌感染培养基。 思考6：倒平板的目的是什么？ 防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面。 思考7：若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？ 不能，空气中的杂菌会在这些粘附培养基上繁殖，并污染皿内的培养基。 二、纯化大肠杆菌 1.平板划线法 用带有微生物的接种环在固体培养基表面通过连续划线而纯化分离微生物的一种方法。 1.将接种环在酒精 灯火焰上灼烧直至 烧红 2.在酒精灯火焰旁冷却接 种环，并打开大肠杆菌的 菌种试管的棉塞。 *