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酵母菌细胞的固定化技术
* 酵母菌细胞的固定化技术 配制CaCl2溶液 配制海藻酸钠溶液 将海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合 固定化酵母细胞 酵母细胞的活化 一、基本步骤: 第一步:酵母细胞的活化 由于缺水,酵母处于休眠状态 加水 活化 活化的干酵母 第二步:配制0.05mol/L的CaCl2 ① 过程 称取无水CaCl2 0.83g,放入200ml的烧杯中,加入150ml的蒸馏水,使其充分溶解,待用 ② 目的 使胶体聚沉 ③注意事项 溶解物质要彻底,勿用自来水溶解,以防自来水中各种离子影响实验结果 第三步:配制海藻酸钠溶液 ① 过程 称取0.2g海藻酸钠,放入40ml蒸馏水,用酒精灯小火间断加热至完全溶化。 ②注意事项 为什么要小火间断加热? 防止海藻酸钠焦糊。 为什么说该步骤是实验成败的关键步骤? 浓度太高: 得不到规则的凝胶珠 浓度太低: 固定的酵母菌太少 第四步:将海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合 ① 过程 将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温,加入以活化的酵母细胞,进行充分搅拌,再转移至注射器中 ②注意事项 为什么要冷却至室温? 防止高温杀死酵母菌。 第五步:固定化酵母细胞 ① 过程 以恒定的速度缓慢的将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中,浸泡30min左右。 ②注意事项 为什么要浸泡30分钟? 以便凝胶珠形成稳定的结构 球形或椭球形,浅黄色 *
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