1.2基因工程的基本操作程序教学课件详细.ppt

基因工程的基本操作程序 （1）目的基因的获取 （2） （3）将目的基因导入受体细胞 （4）目的基因的检测与鉴定 一、目的基因的获取 1.目的基因： 2.获取方法： （一）从基因文库中获取目的基因（序列未知） 1.什么叫基因文库？ （2）操作程序: 提纯含目的基因表达载体 取受精卵 显微注射 移植到输卵管或子宫 受精卵发育 新性状动物 常用法： 常用菌： 微生物作受体细胞原因： 过程： Ca2+处理大肠杆菌 感受态细胞 表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA 3.将目的基因导入微生物细胞 Ca2+处理 大肠杆菌 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对少 导入方法 受体细胞 微生物 动物 植物 受体生物 受精卵 体细胞 受精卵 细胞/个体 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 显微注 射技术 用Ca2+处理成感受态细胞 四、目的基因的检测与鉴定 检测: 是否插入目的基因 是否转录 是否翻译 鉴定: 分子水平鉴定 个体生物学水平鉴定 1、检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因 ① 首先取出转基因生物的基因组DNA； （1）方法: DNA分子杂交 （2）过程: ② 将含目的基因的DNA片段用放射性同位素等作标记,以此做探针； ③ 使探针和转基因生物的基因组杂交,若显示出杂交带,表明染色体已插入染色体DNA中。 （一）检测 2、检测目的基因是