新人教版选修1：4.3《酵母菌细胞的固定化》课件2.ppt

2、固定化酶技术生产高果糖浆 使用固定化酶技术，将葡萄糖异构酶固定在一种颗粒状的载体上，再将这些酶颗粒装到一个反应柱内，柱子底端装上分布着许多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板上的小孔，而反应液却可以自由出入。生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与固定化葡萄糖异构酶接触转化成果糖，从反应柱的下端流出 ①生产过程 ②生产优点 反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高了果糖的产量和质量 二、实验操作 （一）方法 1、包埋法固定化细胞 2、海藻酸钠作载体包埋酵母细胞 （二）制备固定化酵母细胞 1、酵母细胞的活化 ① 过程 称取1g干酵母，放入50ml的小烧杯中，加入蒸馏水10ml。用玻璃棒搅拌，使酵母细胞混合均匀，成糊状，放置1h左右，使其活化 ②注意事项 A、选用的干酵母要具有较强的活性，而且物种单一 B、在缺水状态下，微生物处于休眠状态。活化就是让处于( )的微生物重新恢复正常的生活状态 休眠状态 2、配置物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液 ① 过程 称取无水CaCl2 0.83g，放入200ml的烧杯中，加入150ml的蒸馏水，使其充分溶解，待用 ②注意事项 溶解物质要彻底，勿用自来水溶解，以防自来水中各种离子影响实验结果 3、配制海藻酸钠溶液 称取0.7g海藻酸钠，放入50ml小烧杯中，加入10ml水，用酒精灯加热，边加热边搅拌，将海藻酸钠调成糊状，直至完全溶化，用蒸馏水定容至10ml ① 过程 ②注意事项 加热时要用 ，或者 反复几次，直到海藻酸钠溶化为止 小火 间断加热 海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠；如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少 4、海藻酸钠溶液和酵母细胞混合 将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入以活化的酵母细胞，进行充分搅拌，再转移至注射器中 ① 过程 ②注意事项 A、溶化好的海藻酸钠溶液必须冷却至室温，否则会因温度过高杀死酵母菌 B、搅拌要彻底充分，使两者混合均匀，以免影响实验结果的观察 （5）固定化酵母细胞 以恒定的速度缓慢的将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中，将形成的凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30min左右 ① 过程 ②注意事项 A、可利用海藻酸钠制成不含酵母菌的凝胶珠，用作对照 B、海藻酸钠胶体在CaCl2这种电解质的作用下，发生聚沉，形成凝胶珠，需稳定30min左右 （三）用固定化酵母细胞发酵 ①将固定化酵母细胞（凝胶珠）用蒸馏水冲洗2－3次，洗去凝胶珠表面多余的电解质溶液 1、过程 刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便形成稳定的结构。检验凝胶珠的质量是否合格，可以使用下列方法。一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠是成功的 ②将150ml质量分数为10％的葡萄糖溶液转移至200ml的锥形瓶中，再加入固定好的酵母细胞，置于25°C下发酵24h 2、注意事项 ①控制好发酵温度，一般是室温25 °C ②发酵时间可视具体情况而定，一般时间稍长一些，效果明显 ③可用不含酵母的凝胶珠做相同的处理，对照实验结果 （一）观察凝胶珠的颜色和形状 如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。 （二）观察发酵的葡萄糖溶液 利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产生了很多气泡，同时会闻到酒味 课题成果评价 * 第四节 酶工程简介 教学目标： 知识目标 1、酶工程的概念以及有关生产和应用酶制剂的基础知识（A） 2、酶工程与基因工程、细胞工程和发酵工程之间具有相互交叉渗透的关系（A） 能力目标 1、培养学生获取、分析与处理信息的能力 2、培养学生自学能力 情感目标 1、通过发酵工程的相关信息资料的收集，培养学的STS观点 2、通过发酵工程发展的历史的学习，培养学生热爱科学、勇于探索的精神 教学重点： 1、酶制剂的生产和应用 2、生物工程各分支领域之间的密切关系 教学难点： 生产酶制剂的基本原理 教学手段和方法： 多媒体课件；引导自学和讨论 课时安排： 一课时 作业 复习题 酵母细胞的固定化 一、基础知识 1、酶制剂的概念和种类 （一）酶制剂 含有酶的制品 ①定义： 多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶和脂肪酶 ②种类： A、液体酶制剂 治疗某些胃病的胃蛋白酶液 B、固体酶制剂 2、酶的生产 ①提取法 定义：采用一定的技术直接从动植物或微生物的组织、细胞中将酶提取出来 优点： 简单易行，在