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官方说明书大鼠绒毛膜促性腺激素(CG)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
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大鼠绒毛膜促性腺激素(CG)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供体外研究使用
预期应用
ELISA 法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中CG 含量。
实验原理
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗CG 抗体的微孔中依次加入标本或标准
品、生物素化的抗CG 抗体、HRP 标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB 显色。TMB
在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品
中的CG 呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1.酶联板:一块(96 孔)
2.标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10 分钟以
上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为4,000 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释4,000
pg/ml,2,000 pg/ml,1,000 pg/ml,500 pg/ml,250 pg/ml,125 pg/ml,62.5 pg/ml,样品稀释
液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15 分钟内配制。
如配制2,000 pg/ml 标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)4,000 pg/ml 的上述标准品加入含有
0.5ml 样品稀释液的Eppendorf 管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3.样品稀释液:1×20ml/瓶。
4.检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5.检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6.检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100 稀释,稀释前根据预先计
算好的每次实验所需的总量配制(每孔100ul),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul
检测溶液A加990ul检测稀释液A 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
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7.检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B1:100 稀释。稀释方法同检测溶
液A。
8.底物溶液:1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
11. 覆膜:1×5 张
标本的采集及保存
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20 分钟,取上清即可
检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30 分钟内于2 -8°C1000 x g离心15
分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000 x g 离心20 分钟,取上清即可检测,或将标本
放于-20
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