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官方说明书大鼠维生素 K1(VK1)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
rat Subsistence Vegetarian K1(VK1) elisa immune elisa kit Manual
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大鼠维生素K1(VK1)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究研究使用
预期应用
ELISA 法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养物上清或其它相关液体中Vitamin K1 含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中维生素K1 水平。用纯化的抗体包被微
孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入维生素K1 抗原、生物素化的抗大鼠维
生素K1 抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB 在过氧化物酶
的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的维生素K1
呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成
1.酶联板:一块(96 孔)
2.标准品(冻干品):2 瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,其浓度为10 ng/mL,做
系列倍比稀释后,分别稀释成10 ng/mL,5 ng/mL ,2.5 ng/mL,1.25ng/mL,0.625ng/mL,0.312
ng/mL,0.16ng/mL,其原液直接作为最高标准浓度,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/mL,
临用前15 分钟内配制。
3.样品稀释液:1×20ml/瓶。
4.检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5.检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6.检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以抗体稀释液A1:100 稀释。
7.检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以抗体稀释液B1:100 稀释。
8.底物溶液:1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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标本的采集及保存
1.细胞培养物上清:请离心后收集上清,并将标本保存于-20℃,且应避免反复冻融。
2.血清:标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 xg 离心20 分钟,取上清即可检测,
或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30 分钟内于2 - 8°C1000 x g离心15
分钟,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
操作步骤
各试剂在使用前平衡至室温。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。除空白孔外,余孔分别加标准溶液或待测样
品100ul,轻轻混匀,37℃,120 分钟。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。
3.每孔加检测溶液
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