小鼠和山羊胚胎干细胞建系及其分化为神经元细胞的基础分析-发育生物学专业论文.docx

山 东 大 学 博 士 学 位 论 文，胞 的 分 离 培 养对 照 组 培 养 体 系 中 不 添 加 小 鼠此 外还 比 较 了 不 同 饲 养。，，，，层 细 胞 对 山 羊样 细 胞 增 殖 的 影 响并 验 证 了 获 得 的 山 羊样 细 胞 神 经 分 化 的 能。，，力结 果 显 示 培 养 基 中 添 加的 小 鼠个 内 细 胞 团 集 落 中有 个 可 分，，离 出 山 羊样 细 胞其 中 有 两 个 可 传 代核 型 分 析 为 正 常条 染 色 体碱 性 磷 酸。，酶 染 色 呈 强 阳 性而 不 添 加 小 鼠个 内 细 胞 团 集 落 中 只 有 一 个 能 够 分 离，，，出 山 羊样 细 胞且 体 外 只 能 传 代此 外山 羊样 细 胞 只 有 在 小 鼠胚 胎 成 纤维 细 胞叮饲 养 层 上 才 能 形 成 干 细 胞 集 落在。，山 羊 胚 胎 成 纤 维 细 胞 上 无 法 形 成 干 细 胞 集 落虽 然 获 得 的 山 羊样 细 胞 同 小 鼠，，在 集 落 形 态 等 方 面 非 常 相 似但 在 体 外 传 代 方 式 上 存 在 很 大 差 异山 羊样，，细 胞 只 有 以 细 胞 团 块 的 形 式 传 代 时 才 能 形 成 集 落而 一 旦 消 化 成 单 个 细 胞克 隆。，形 成 率 将 大 大 降 低山 羊样 细 胞 悬 浮 培 养 也 可 形 成但 未 能 象 小 鼠形，，成 的一 样 产 生 跳 动 的 心 肌 细 胞这 说 明 其 分 化 能 力 是 有 限 的但 体 外 可 以 分 化。成 神 经 元 细 胞以 上 结 果 证 实小 鼠可 能 分 泌 除外 的 某 些 细 胞 因 子 能 够 促，进 山 羊样 细 胞 的 增 殖然 而中 何 种 因 子 如 何 发 挥 这 一 作 用 有 待 进 一 步 研。，究本 文 采 用 的 添 加 小 鼠的 培 养 体 系 可 以 用 于 与 小 鼠生 长 及 分 化 特 性，不 同 的 山 羊样 细 胞 的 分 离 培 养能 够 提 高 山 羊样 细 胞 分 离 克 隆 效 率并 能 促。，进 早 期 传 代 过 程 中 山 羊样 细 胞 的 增 殖从 而 有 望 将 该 培 养 体 系 用 于 人的 分，离 培 养提 高 分 离 克 隆 效 率以 便 为 开 展 细 胞 移 植 治 疗 神 经 退 行 性 疾 病 的 研 究 提。供 材 料 来 源，，最 后以 来 源 丰 富 的 小 鼠为 材 料 探 讨 将 其 有 效 分 化 成 神 经 元 细 胞 的 新 方。法采 用 胶 质 细 胞 条 件 培 养 基诱 导 小 鼠，分 化 成 神 经 元 细 胞对 照 组 采 用 小 鼠 胚 胎 成 纤 维 细 胞 条 件 培 养 基，。，，，代 替结 果 显 示在 贴 壁 状 态 下 不，经 形 成天 内 小 鼠在中 可 有 效 分 化 成 神 经 元 细 胞而 星 型 胶 质 细 胞。，的 产 生 受 到 限 制胶 质 细 胞 分 泌 的 细 胞 因 子 对早 期 分 化 没 有 特 异 的 影 响但。，可 以 影 响 神 经 细 胞 谱 系 决 定该 研 究 结 果 证 实在 贴 壁 条 件 下 用诱 导分、、，化 成 神 经 元 细 胞 是 一 个 高 效简 单节 时 的 方 法可 以 为 进 一 步 通 过 细 胞 移 植 治。，，疗 神 经 方 面 的 疾 病 提 供 大 量 的 神 经 元 细 胞此 外当 小 鼠在中 分 化 时，小 时 后 即 开 始 分 化 成 神 经 前 体 细 胞后 者 两 天 后 开 始 分 化 成 神 经 元而 直山 东 大 学 博 士 学 位 论 文，到 第 九 天源 于的 神 经 前 体 细 胞 才 开 始 分 化 成 星 型 胶 质 细 胞该 次 序 同 胚 胎。。发 育 过 程 中 神 经 细 胞 谱 系 决 定 的 次 序 一 致这 为 研 究 神 经 细 胞 谱 系 决 定 提 供 了 一。个 良好 的 体 外 研 究 模 型，本 文 在 成 功 建 立 小 鼠细 胞 系 的 基 础 上采 用 添 加 小 鼠的 培 养 体 系。成 功 分 离 获 得 体 外 具 有 神 经 分 化 能 力 的 山 羊样 细 胞并 建 立 了 简 单 有 效 的 将 小。鼠分 化 成 神 经 元 细 胞 的 新 方 法本 研 究 为 进 一 步 将 这 一 培 养 体 系 用 于 同 小 鼠，。特 性 不 同 的 人的 分 离 与 培 养并 采 用 这 一 分 化 新 方 法 进 一 步 将 人，分 化 成 神 经 元 细 胞为 通 过 细 胞 移 植 治 疗 神 经 退 行