线粒体dna在α粒子致人支气管上皮细胞体外恶性转化中作用-卫生毒理学专业论文.docxVIP

下载本文档

3
0
约7.95万字
约 90页
2018-05-05 发布于上海
举报
版权申诉

线粒体dna在α粒子致人支气管上皮细胞体外恶性转化中作用-卫生毒理学专业论文.docx

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

线粒体dna在α粒子致人支气管上皮细胞体外恶性转化中作用-卫生毒理学专业论文

MitochondrialDNA-dependentsignalingpathwayis involvedintheprocess ofαparticles-induced malignanttransformationinvitroAbstractObjective：ToexploretheroleofmitochondrialDNA(mtDNA)intheprocess of malignanttransformationinducedbyα-particles,andinthemechanismsofdisabled apoptosis.Methods:(1)Humanbronchialepithelialcells(HBE)wereculturedinmedium containing50ng/mLethidiumbromide(EtBr)for9daysandconsecutivelywith12.5 ng/mLEtBrforother30daystoestablishmtDNA-depletedHBE(HBEρ-).ThemtDNA copynumbersweredeterminedbyreal-timePCR.TheEtBr-treatedHBEwerethen scoredformtDNAdepletionbylivecellimagingafterstainingwithPicogreenand MitoTrackerRed.Also,HBEρ-wasculturedin“ρ0testmedium”toverifyits auxotrophiccharacteristicforuridineandpyruvate.Weassessedthegrowthkineticsof HBEρ+andHBEρ-byrecordingcellsgrowthcurve.Cytochromecoxidase(COX) activitywasmeasuredwithbiochemicalkit.Flowcytometry(FCM)wasusedtodetect mitochondrial membrane potential (ΔΨm) and intracellular reactive oxygenspecies(ROS).(2)HBEρ+ andρ-cellswereexposedtodifferentdoses(0、0.3、0.6Gy)ofα-particles,andweresub-culturedtopassage20and40.Anchorage-independentcell proliferationwasdeterminedbythesoftagarassayandwound-healingassaywas performedtoassessinvasiveness/metastaticpotential.Theplatingefficiencyassaywas performedtodetectthesurvivingfraction.Spontaneousapoptosiswasmeasuredwith theuseofJC-1,AnnexinV-FITC/PIorPI-stainingflowcytometryseparately. Calculationofthedoublingtimeswasbasedoncellsgrowthcurve.Distributionofthe cellcyclewasanalyzedbyflowcytometryafterbeingstainedwithPI.(3)The expression of apoptosis-related molecules Bax, Bcl-2, cyt-c, caspase-9, caspase-8,英文摘要线粒体DNA在α粒子致人支气管上皮细胞体外恶性转化中的作用caspase-3inirradiatedρ+andρ-atpassage20and40wasdetectedbywesternblotting analysis.ROSproductionwasdeterminedbyfluorescentstainingwithH2DCFDAand mtDNAcontentwas analyzedbyreal-timePCR.Results:(1)Real-timePCRandmtDNAstainningshowedthatthecontentof mtDNAinEtBr-treatedHBEcellswas24%ofthewide-typeHBE.Moreover,the EtBr-treatedcellscouldn’tsurv