香叶木苷的抗辐射损伤作用机制研究-食品科学与工程专业论文.docx

摘要香叶木苷是一种从蓬子菜中提取的黄酮类化合物，该天然产物在治疗静脉血栓、增强静脉血管张力、治疗淋巴系统疾病、降低出血等方面效果显著，本实验着重研究香叶木苷的抗辐射机制，通过进行细胞体外实验、动物体内实验及对小鼠肝脏辐射损伤蛋白电泳分析蛋白差异点来对香叶木苷抗辐射机理进行研究。通过一系列实验，以获得以下研究成果：（1）对脾淋巴细胞及PC12细胞进行体外培养，以60Co-γ射线照射为模型，研究脾淋巴细胞的增殖、存活率及细胞的氧化损伤。通过实验证明，在辐照前给细胞加药，香叶木苷在浓度为80μg/ml时，能够促进细胞增殖，提高细胞存活率；而在此剂量下，能够有效降低氧化损伤，如提高超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）活力，降低细胞内丙二醛（MDA）的含量。而通过对PC12进行细胞周期和细胞凋亡测定，得出香叶木苷能够促进细胞分化，减少细胞因辐照所造成的损伤。（2）通过建立60Co-γ射线辐照模型，对连续灌胃14天香叶木苷的小鼠进行一系列的指标测定，来确定香叶木苷的抗辐射作用。实验发现，香叶木苷能够对小鼠的体重、白细胞、肝脏和脾脏等免疫器官起到保护作用，且能够提高小鼠组织的SOD活性、GSH-px活性，降低小鼠组织的MDA含量、染色体畸变率和骨髓微核率。这些说明，香叶木苷能够通过提高内源性抗氧化物酶活性而增强抗氧化活力，能够降低DNA损伤，保护小鼠免受辐射损伤的作用。（3）通过对辐照防护实验中小鼠的肝脏蛋白质进行2-DE蛋白质双向电泳学分析，结果表明，和空白组相比，辐照组2 倍上调蛋白点为33 个，2 倍下调蛋白质点35个；和辐照组比，香叶木苷加药组的2倍上调蛋白点为82个，2倍下调点为9个。从中选取10个差异点ssp（1608、2202、2303、2401、2409、3001、3305、4608、9101、9702）进行分析MALDI-TOF-MS分析，发现分别为乙酰辅酶A-酰基转移酶2、肽基脯氨酸顺反异构酶A、3-羟基苯甲酸3,4双氧化酶、三维结构-肌浆球蛋白-V、异质性胞核核糖核蛋白A2/B1、磷酸丙糖异构酶（TPI）、果糖-二磷酸醛缩酶B、蛋白二硫异构酶、血红蛋白β亚基、线粒体ATP合成酶β亚基。关键词：香叶木苷；黄酮类化合物；辐射防护；蛋白质组AbstractThediosminisaflavonoidwhichextractedfromGaliumverumL.andithasansignificantefficacytoinhibitvenousthrombosis,enhancevenoustone,treatlymphaticsystemdisorders, reduceblending. Thisstudyanalysis focusesontheradioprotectivepropertiesofdiosmin,byperforminginvitroexperiments、invivoexperimentsandusingmiceliverproteinstofinddifferentproteinpoints.Throughaseriesofexperiments, wecanobtainthe followresearchresults:Onspleniclymphocytes andPC12cellswereculturedasamodeltostudythespleniclymphocyleproliferation,survivalandcellularoxidativedamage.Theexperimentprovethatdiosmincaneffectivelyreducecellmortality andimprovecellviabilitywhenataconcentrationof80μg/mlbeforeirradiation.Whileatthisdose,diosmincancaneffectivelyreducecellsdamage,suchasincreasedsuperoxidedismutase (SOD) ,glutathione (GSH-px)activityandreduceintracellularmalondialdehyde(MDA)levels.ThroughthePC12cellscycleandapoptosisdetermination,wecanlearnthatdiosmincanpromotecellsdifferentiation and reducethedamagecausedbyirradiation.Byestablishing60Co-γrayirradiationmodelofcontinuousgavage