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??? 4．碳水化合物代谢的研究 （1） 用14C定位标记和全标记的葡萄糖为基质研究碳水 化合物代谢。 （2） 用14C标记的脂肪酸和有机酸来研究植物体内脂肪 的生物合成和降解以及有机酸的代谢。 （3） 用14C标记的CO2研究某些植物根部吸收CO2的能力。 二、光合产物运输速率的研究 三、光合碳同化途径的研究 14C标记研究光合碳同化途径取得了许多成果。 1．光合初产物和Calvin循环 1948 Calvin等 采用核素示踪结合纸层析法研究光合初产物为3-磷酸 甘油酸（PGA）。其受体为1.5二磷酸核酮糖（RUBP）。 研究方法： 通过光照绿藻悬浮液，向悬浮液投入NaH14CO3溶液 ，取 不同时间杀死绿藻 ，从中提取全部含有14C的代谢产物 进行层析自显影，发现同化时间越长，14C化合物种类越 多，其中60秒的自显影片上黑斑很多，3秒的种类最少， 即为3-磷酸甘油酸（PGA）。由此证明了藻类光合作用的 第一个初产物是PGA。 通过急速降低14CO2浓度，设想生成物PGA减少，某种物质将 积累增加。结果证明其受体为1.5二磷酸核酮糖（RUBP）。 Calvin等 通过研究14C在各物质分子中的位置， 最后确定了著名的光 合碳循环理论——Calvin循环，即C3途径。 * * 主 讲 内 容 §8.2 用14C研究高等植物光合作用 § 8.3 植物根系发育与吸收作用 第八章 示踪技术在植物生长发育 及生理代谢中的应用 §8.1 在植物营养生理研究中的应用 § 8.4 示踪法在植物生长物质研究中的应用 § 8.1 植物体内物质代谢的示踪研究 一、用于植物体内物质代谢的研究 氨基酸合成研究 植物营养生理 研究 光合作用 同化物的运输、分配与积累 土壤养分的吸收和利用 用15N标记氮肥 测定植物根部各种氨基酸15N丰度 确定各种氨基酸15N丰度增加的顺序 谷氨酸，而天冬氨酸和其他氨基酸均由谷氨酸转氨基而来。 实验结果：首先形成 2．蛋白质合成的研究 植物体内物质代谢的研究 蛋白质的合成 外界因素对蛋白质合成的影响（如光照、温度和激素等的影响） 应用 14C、15N、3H标记的氨基酸研究 3． 核酸代谢的研究 采用32P、14C、15N、3H标记的核苷酸或其他前身物来示踪研究核酸的合成。 植物体内物质代谢的研究 研究意义： 光合作用是植物生命活动最基本的物质和能量来源 。 研究特点： 同位素示踪技术在研究植物光合作用及其同化产物的 运转、分配与再利用等代谢过程中作出了巨大贡献。 研究的主要内容： （1）光合速率； （2）光合同化产物的运输途径与方向； （3）运输物质的种类与形态； （4）合同化产物的运输速度； （5）同化物在株体内的分配与再分配； （6）某些物理、化学、生物因子对同化物运转过程的影响。 § 8.2 用14C研究高等植物的光合作用 一、光合产物运输途径的研究 （一）研究方法 1．环割法 环割茎或叶柄 —→植株叶部饲喂14CO2，—→（一定时间后）在环割处的上下方取样—→ 测样品放射性—→确定物质运输途径。 环割：木本植物采用刀具；大豆用烫伤（热熔石腊杀死韧皮部细胞） 2．隔离法 在植物茎韧皮部和木质部间插入不透水蜡质—→饲喂14CO2 —→ （一定时间后）测各部位放射性—→ 确定物质运输方向 3．蚜虫吻刺法 植株饲喂14CO2 —→培养蚜虫—→切断其吻剌下唇—→ ，用滤纸吸取切口流出的筛管汁液 —→ 测其放射性活度 —→了解韧皮部的营养物质运输情况。 用14C研究高等植物的光合作用 （二）试验要点 1．选用14CO2作示踪剂 2．采用适宜的14CO2引入与测量方法 （1）整体引入法：将整株植株移入同化箱饲喂14CO2。 （2）局部引入法：对植株某个器官饲喂14CO2。 （3）14CO2始终浓度：0．5-0．1%。 （4）光照强度：略低于光饱和点。 （5）制样与放射性测量：燃烧法制样、液闪测量或自显影法观察。 （三）实例（水稻研究） 分 蘖 期 ：主茎同化的14C主要输送到正在伸长的叶和根。 幼穗形